因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA試劑盒反應總是需要一定時間的溫育。 ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會，這是一個逐步平衡的過程，ELISA試劑盒只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
  溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗。在建立ELISA試劑盒方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時，產(chǎn)物的生成可達。為加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜，以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長，在ELISA試劑盒中一般不予采用。

Cytomegalovirus (CMV)PP65 細胞巨化病毒(多肽)
DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脫羧酶（抗原）
EGFR- V III 人表皮生長因子受體-8（多肽片斷抗原）
Alpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase) α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原
SCCA peptide 鱗狀細胞癌抗原
Endothelin-1 內(nèi)皮素-1(多肽抗原)
Endothelin-1 (ET-1) 內(nèi)皮素-1（抗原）
ERAB  內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白（抗原）
PAPPA 相關(guān)血漿蛋白A
TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1（抗原）

ELISA試劑盒