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ELISA試劑盒攻略的重要性

時間:2016-3-29閱讀:268
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ELISA試劑盒適當(dāng)?shù)膶φ諏τ贗HC/ICC結(jié)果的準(zhǔn)確闡釋至關(guān)重要,令人滿意的IHC/ICC實(shí)驗(yàn)設(shè)計可產(chǎn)生結(jié)果,說明抗原位于正確的組織、細(xì)胞類型或亞細(xì)胞定位,固定、封閉、抗體孵育和抗原修復(fù)步驟的優(yōu)化將產(chǎn)生強(qiáng)烈而特異的信號,然而,有時實(shí)驗(yàn)也會出現(xiàn)假象哦,蒙蔽了你的雙眼。因此,IHC/I小鼠ELISA試劑盒CC實(shí)驗(yàn)必須包含陽性和陰性對照。
此外,抗體特異性、實(shí)驗(yàn)條件、組織類型之間生物學(xué)條件、甚至研究人員的差異都可能產(chǎn)生不一致的染色,導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)論。為了實(shí)現(xiàn)性能一致,詳細(xì)記錄是IHC/ICC研究的一個重要因素。在此,我們介紹了一些*的對照,可支持您IHC/ICC結(jié)果的特異性。
ELISA試劑盒為了證明抗體是與目的抗原特異結(jié)合,首先要將抗體與免疫原預(yù)孵育。這會使抗體失活,組織應(yīng)該無染色或很少染色??乖c抗體的混合物應(yīng)以10:1(摩爾比)配制,并在4 °C預(yù)孵育過夜。隨后將預(yù)吸附的抗體與組織共同孵育,以取代一抗。將一抗產(chǎn)生的染色模式與預(yù)吸附抗體產(chǎn)生的相比較。
如果免疫原是肽段,那么吸附對照效果更好。不過,如果抗體是由整個蛋白產(chǎn)生的,則抗體與蛋白混合物的添加可能導(dǎo)致更高的非特異染色。盡管機(jī)理還不清楚,但有可能是預(yù)吸附所用的抗原本身與組織結(jié)合,產(chǎn)生非特異染色。因此,ELISA試劑盒提醒必須注意,使用整個蛋白的吸附對照不一定能驗(yàn)證抗體與組織中蛋白結(jié)合的特異性。

CHMP2B    染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體
CKAP1    細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體
CLN5    神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5抗體
CLN8    神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN8抗體
CRBN    cereblon蛋白抗體
CTRP5    補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白5抗體
CUG-BP1    胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1抗體
Chordin    原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體
CDC123    細(xì)胞分裂周期蛋白CDC123抗體
CLN3    神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體
CKLFH3    趨化素樣因子超家族成員3抗體
CHMP1B    染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
CIRBP    冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體

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