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生物科研標(biāo)準(zhǔn)品
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酶聯(lián)與核酸結(jié)合

時(shí)間:2016-3-17閱讀:257
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ELISA試劑盒

下面來看看技術(shù)匯集之包被。已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個(gè)月。有些不完整的試盒,僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被,     將抗原或抗體固定在過程稱為包被。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。     IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。     間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少,僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射,以增加其吸附性能。     固相載體先用堿性蛋白質(zhì),如聚賴氨酸、魚精蛋白等作預(yù)包被,也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

六氯乙烷;全氯乙烷;六氯化碳;過氯乙烷;六氯化二碳    Hexachloroethane;Carbon hexachloride    67-72-1
(1-十六烷基)溴化吡啶,一水化合物    1-Hexadecylpyridinium bromide    140-72-7
十六烷基*基溴化銨;鯨蠟烷*基溴化銨    HexadecyltriMethylaMMoniuM broMide;CetriMoniuM broMide;CetriMide;Cetavlon;CTAB    57-09-0
六甲苯    HexaMethylbenzene;Mellithene    87-85-4
六甲基二硅醚;六甲基氧二硅烷;六甲基二硅氧烷    HexaMethyldisiloxane;HMDSO    107-46-0
己二腈;己烷二腈;1,4-二氰基丁烷    Hexanedinitrile;1,4-Dicyanobutane;TetraMethylene dicyanide;Adipic dinitrile    111-69-3
三十六烷;正三十六烷    Hexatriacontane    630-06-8
馬尿酸;苯甲酰氨基乙酸;苯甲酰甘氨酸    Hippuric acid;Benzoyl-aMino acetic acid;N-Benzoylglycine;Benzoylglycocoll    495-69-2
組胺磷酸鹽;二磷酸組織胺    HistaMine phosphate;Histapon    51-74-1
高香草酸;4-羥基-3-甲氧基-α-甲苯甲酸;4-羥基-3-甲氧基苯乙酸    HoMovanillic acid;4-Hydroxy-3-Methoxy-α-toluic acid;4-Hydroxy-3-Methoxyphenylacetic acid;HoMoprotocatechuic acid 3-Methyl ether;HVA    306-08-1
透明質(zhì)酸鈉鹽;透明質(zhì)酸鈉;動(dòng)物糖醛酸鈉;玻璃(糖醛)酸鈉    Hyaluronic acid sodiuM salt;Connettivina;Equron;Healon;Healonid;Hya-lgan;Hyalovet;Opegan;Synacid    9067-32-7
透明質(zhì)酸,從雞冠花所得    Hyaluronic acid    9004-61-9
硫酸肼;肼硫酸鹽;硫酸聯(lián)氨    Hydrazine sulfate;DiaMidogen sulfate;HydraziniuM sulfate;HydrazoniuM sulfate    10034-93-2

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