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進(jìn)口ELISA試劑盒代測具體方法

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進(jìn)口ELISA試劑盒代測具體方法
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120ng/L,80ng/L ,40ng/L,20ng/L,10ng/L)。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
進(jìn)口ELISA試劑盒代測紅細(xì)胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA試劑盒    ,英文名:    STOM ELISA Kit
紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CR1 ELISA Kit
亨廷頓關(guān)聯(lián)蛋白1(HAP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    HAP1 ELISA Kit
亨廷頓蛋白(HTT)ELISA試劑盒    ,英文名:    HTT ELISA Kit
黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)ELISA試劑盒    ,英文名:    MFI2 ELISA Kit
黑素曲菌素(MREG)ELISA試劑盒    ,英文名:    MREG ELISA Kit
黑素親和素(MLPH)ELISA試劑盒    ,英文名:    MLPH ELISA Kit
黑素皮質(zhì)激素5受體(MC5R)ELISA試劑盒    ,英文名:    MC5R ELISA Kit
黑素皮質(zhì)激素4受體(MC4R)ELISA試劑盒    ,英文名:    MC4R ELISA Kit
黑素皮質(zhì)激素3受體(MC3R)ELISA試劑盒    ,英文名:    MC3R ELISA Kit
黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)ELISA試劑盒    ,英文名:    MIA1 ELISA Kit
黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCAM ELISA Kit
黑素瘤缺乏因子2(AIM2)ELISA試劑盒    ,英文名:    AIM2 ELISA Kit
黑素瘤缺乏因子1(AIM1)ELISA試劑盒    ,英文名:    AIM1 ELISA Kit
黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原(PRAME)ELISA試劑盒    ,英文名:    PRAME ELISA Kit
黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCSP ELISA Kit
黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20(ME20M)ELISA試劑盒    ,英文名:    ME20M ELISA Kit
黑色素聚集激素受體1(MCHR1)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCHR1 ELISA Kit
黑色素A(MLANA)ELISA試劑盒    ,英文名:    MLANA ELISA Kit
赫曼斯基普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)ELISA試劑盒    ,英文名:    HPS6 ELISA Kit
核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)ELISA試劑盒    ,英文名:    NFYC ELISA Kit
核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)ELISA試劑盒    ,英文名:    NUMA1 ELISA Kit
核因子相關(guān)κB結(jié)合蛋白(NFRkB)ELISA試劑盒    ,英文名:    NFRkB ELISA Kit
核因子κB抑制因子β(IκBβ)ELISA試劑盒    ,英文名:    IκBβ ELISA Kit
核因子κB抑制因子α(IκBα)ELISA試劑盒    ,英文名:    IκBα ELISA Kit
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)ELISA試劑盒    ,英文名:    RANκL ELISA Kit
核因子κB受體激活因子(RANκ)ELISA試劑盒    ,英文名:    RANκ ELISA Kit
核因子κB激酶抑制因子相互作用蛋白(IκBIP)ELISA試劑盒    ,英文名:    IκBIP ELISA Kit
核因子κB2(NFκB2)ELISA試劑盒    ,英文名:    NFκB2 ELISA Kit
核因子κB(NFκB)ELISA試劑盒    ,英文名:    NFκB ELISA Kit
核氧化還原蛋白(NXN)ELISA試劑盒    ,英文名:    NXN ELISA Kit
核小體裝配蛋白1樣1(NAP1L1)ELISA試劑盒    ,英文名:    NAP1L1 ELISA Kit
核纖層蛋白B2(LMNB2)ELISA試劑盒    ,英文名:    LMNB2 ELISA Kit進(jìn)口ELISA試劑盒代測

 

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