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91次小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測試劑盒標(biāo)本的采集及保存:
1.血清:標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測試劑盒操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時(shí)蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
注:
1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
2.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測改指標(biāo),且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測試劑盒注意事項(xiàng):
1.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
4.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
6.底物請(qǐng)避光保存。
檢測范圍:
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說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.有效期:6個(gè)月
3.濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
5.中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。
PDGF-A 血小板源性生長因子A抗體
C11orf73 11號(hào)染色體開放閱讀框73抗體
PCYT1A 磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶A抗體
Prostaglandin I2 Receptor 前列環(huán)素受體抗體
PCDH7 原鈣粘蛋白7抗體
PXMP1 過氧化物酶膜蛋白1抗體
Plakophilin 2 橋粒斑菲素蛋白2抗體
PSCDBP 胞粘蛋白結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白抗體
PCTAIRE2 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PCTK2抗體
PDE7A 磷酸二酯酶7抗體
PDE7B 磷酸二酯酶7B抗體小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測試劑盒
PHOX2A 先天性眼外肌纖維化相關(guān)蛋白FEOM2抗體
PHOX2B 神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白PHOX2B抗體
p35 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體
p16 ARC 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基5抗體
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