豬 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 體 （ P E D V - A b ） 酶 聯(lián) 免 疫 分 析  

試 劑 盒 使 用 說 明 書  

本 試 劑 盒 僅 供 研 究 使 用 。  

檢 測 范 圍 ：                                                                                                                     9 6 T  

1 5   U / L   - 4 0 0   U / L  

使 用 目 的 ：  

本 試 劑 盒 用 于 測 定 豬 血 清 、 血 漿 及 相 關(guān) 液 體 樣 本 中 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 體 （ P E D V - A b ）

含 量 。  

實 驗 原 理  

本 試 劑 盒 應(yīng) 用 雙 抗 原 夾 心 法 測 定 標 本 中 豬 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 體 （ P E D V - A b ） 水 平 。 用

純 化 的 豬 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 原 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 原 ， 往 包 被 的 微 孔 中 依 次 加 入 流 行 性

腹 瀉 病 毒 抗 體 （ P E D V - A b ） ， 再 與 H R P 標 記 的 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 原 結(jié) 合 ， 形 成 抗 原 - 抗 體 - 酶

標 抗 原 復(fù) 合 物 ， 經(jīng) 過 徹 底 洗 滌 后 加 底 物 T M B 顯 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 轉(zhuǎn) 化 成 藍 色 ，

并 在 酸 的 作 用 下 轉(zhuǎn) 化 成 zui 終 的 黃 色 。 顏 色 的 深 淺 和 樣 品 中 的 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 體

（ P E D V - A b ） 呈 正 相 關(guān) 。 用 酶 標 儀 在 4 5 0 n m 波 長 下 測 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 過 標 準 曲 線 計

算 樣 品 中 豬 流 行 性 腹 瀉 病 毒 抗 體 （ P E D V - A b ） 濃 度 。    

試 劑 盒 組 成    

1   3 0 倍 濃 縮 洗 滌 液   2 0 m l × 1 瓶   7   終 止 液   6 m l × 1 瓶  

2   酶 標 試 劑   6 m l × 1 瓶   8   標 準 品 （ 8 0 0   U / L ）   0 . 5 m l × 1 瓶  

3   酶 標 包 被 板   1 2 孔 × 8 條   9   標 準 品 稀 釋 液   1 . 5 m l × 1 瓶  

4   樣 品 稀 釋 液   6 m l × 1 瓶   1 0   說 明 書   1 份  

5   顯 色 劑 A 液   6 m l × 1 瓶   1 1   封 板 膜   2 張      

6   顯 色 劑 B 液   6 m l × 1 / 瓶   1 2   密 封 袋   1 個  

標 本 要 求    

1 ． 標 本 采 集 后 盡 早 進 行 提 取 ， 提 取 按 相 關(guān) 文 獻 進 行 ， 提 取 后 應(yīng) 盡 快 進 行 實 驗 。 若 不 能

馬 上 進 行 試 驗 ， 可 將 標 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 應(yīng) 避 免 反 復(fù) 凍 融  

2 ． 不 能 檢 測 含 N a N 3 的 樣 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 過 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。  

操 作 步 驟  

1 .   標 準 品 的 稀 釋 ： 本 試 劑 盒 提 供 原 倍 標 準 品 一 支 ， 用 戶 可 按 照 下 列 圖 表 在 小 試 管 中 進 行 稀

釋 。  

4 0 0   U / L   5 號 標 準 品   1 5 0 μ l 的 原 倍 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液  

2 0 0   U / L   4 號 標 準 品   1 5 0 μ l 的 5 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液  

1 0 0   U / L   3 號 標 準 品   1 5 0 μ l 的 4 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液  

5 0   U / L   2 號 標 準 品   1 5 0 μ l 的 3 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液  

2 5   U / L   1 號 標 準 品   1 5 0 μ l 的 2 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液