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撫生試劑-ELISA試劑盒法有雙抗體夾心法和間接法

時間:2014-6-30閱讀:253
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ELISA試劑盒法有雙抗體夾心法和間接法

    而且質量也是參差不齊,那么我們怎樣才能選出zui適用的產品呢?首先要根據我們所要檢測的分子進行檢測,除此以外也還有一些需要加以考量的因素,下面就為大家提供幾點參考。
1. 實驗類型:
ELISA試劑盒有多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進行捕獲。通常人們使用雙抗夾心法進行ELISA實驗,雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間,這種方法既靈敏又有效,受到了許多研究者的青睞。
2. 抗體類型:
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA,實際上有時候二者結合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進行捕獲而單抗進行檢測有時更有幫助。雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點,為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。
3. 交叉反應:
如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越容易,我們仍有必要確認一下是否會產生交叉反應的問題。在用雙抗夾心法進行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應。
4. 檢測方式:
如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應體系中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。

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