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當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>選擇的細(xì)胞分離ELISA試劑盒
這兩種細(xì)胞分離試劑盒如何取舍,主要取決于目標(biāo)細(xì)胞的表面是否具有特異性強的篩選標(biāo)志。這樣的篩選標(biāo)志能夠?qū)崿F(xiàn)特異性的捕獲,避免所獲得的細(xì)胞被非目標(biāo)細(xì)胞污染。
如果你的目標(biāo)細(xì)胞剛好具有這樣的篩選標(biāo)志,那么正向選擇的細(xì)胞分離試劑盒就是*選擇。但如果目標(biāo)細(xì)胞并不具有特異性強的篩選標(biāo)志,那我們還是選用負(fù)向。
篩選標(biāo)志的確定
通過PubMed等數(shù)據(jù)庫中的文獻,ELISA試劑盒我們一般可以確定在目標(biāo)上表達的篩選標(biāo)志。如果文獻中找不到適合自己的表面標(biāo)志,我們還可以用目標(biāo)的DNA序列進行BLAST搜索。BLAST搜索結(jié)果會顯示,目標(biāo)細(xì)胞上可能表達的表面標(biāo)志,在此基礎(chǔ)上可以選取用于捕獲的細(xì)胞表面蛋白。
舉例來說,對一個T進行BLAST搜索,結(jié)果會顯示該是否表達CD4或CD8。在得知目標(biāo)表達CD4之后,我們可以先對樣品進行一個免疫實驗(如ELISA),以檢驗BLAST搜索的結(jié)果。一旦證實目標(biāo)的確表達CD4,我們就可以用相應(yīng)試劑盒來篩選CD4陽性的T細(xì)胞。對于一個旨在分離CD4陽性T的試劑盒來說,ELISA試劑盒操作流程主要有以下幾步。首先,將樣品與anti-CD4抗體包被的磁珠共同孵育,使抗體與CD4+ T結(jié)合。然后洗去不需要的非目標(biāo)(即不表達CD4的),留下磁珠-抗體-復(fù)合物。
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