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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>撫生試劑-RNA聚合酶I~Ⅲ抗體的檢測方法
IIF法是常用的檢測方法,其熒光圖形為間期細(xì)胞核仁呈斑點(diǎn)狀著染,分裂期染色質(zhì)核仁區(qū)域呈細(xì)小點(diǎn)狀著染。幾乎所有的抗RNAPI抗體陽性血清也含RNAPⅢ抗體和(或)RNAPⅡ抗體,其熒光圖形有的與單純抗RNAP工抗體相同,有的呈現(xiàn)類似U1—snRNP抗體樣的核漿斑點(diǎn)狀著染,而核仁陰性。原因是RNAPⅡ、Ⅲ靶抗原位于核漿區(qū),從而相應(yīng)的抗體呈斑點(diǎn)狀核漿著染。因而單憑熒光圖形難以區(qū)別抗RNAP工、Ⅱ、Ⅲ抗體與其他的抗核抗體。
以Hela細(xì)胞提取物為抗原的蛋白質(zhì)印跡法和放射免疫沉淀法是較早開展的檢測抗RNAP抗體的方法。但是以全細(xì)胞作為抗原進(jìn)行檢測,往往出現(xiàn)假陰性結(jié)果,原因是RNAPs分子在細(xì)胞中的量不足以出現(xiàn)肉眼可見的陽性條帶。如果將細(xì)胞提取液純化,將得到很好的結(jié)果。蛋白質(zhì)印跡結(jié)果顯示RNAPs抗體有兩種亞型并分別識別大亞基和小亞基。
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