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多克隆抗體及單克隆抗體的制備

時(shí)間:2025/2/24閱讀:29
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1、多克隆抗體的制備:

①免疫方法:對(duì)多克隆抗體,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內(nèi)免疫法、淋巴結(jié)免疫法和混合法等。一般來(lái)說(shuō),皮下或肌肉免疫法產(chǎn)生的抗體比較多;皮內(nèi)免疫法所需的抗原量少,在抗原寶貴時(shí)特別適用,但與之相對(duì)的,它產(chǎn)生的抗體量也不多。混合免疫法的優(yōu)點(diǎn)是抗原用量小,產(chǎn)生抗體速度快。

②多克隆抗體的制備:將抗原免疫動(dòng)物(常用的動(dòng)物為兔、羊、狗等),分離出抗血清并純化抗體。多克隆抗體的均一性較差,其特異性相對(duì)較低,因此,多克隆抗體在農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中的應(yīng)用受到一定的限制。但近年來(lái)有學(xué)者恰恰利用了多抗的交叉反應(yīng)高的特點(diǎn),通過(guò)制備出具有某類(lèi)(或某幾種)農(nóng)藥的“共性結(jié)構(gòu)"的半抗原或者通過(guò)制備出含多個(gè)抗原決定簇的人工抗原來(lái)制備“寬譜特異性"抗體,進(jìn)行農(nóng)藥多殘留分析研究。

2、單克隆抗體的制備:

單克隆抗體制備技術(shù)最初是由K鰄ler和Milstein(1975)利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)創(chuàng)立的。目前該技術(shù)已廣泛應(yīng)用于疾病診斷及生物、醫(yī)學(xué)研究、環(huán)境和食品安全檢測(cè)(監(jiān)測(cè))等方面。單抗均一性高,只和抗原某一決定簇結(jié)合,有更高的特異性,而且,產(chǎn)生抗體的單克隆細(xì)胞可在體外傳代繁殖,不受動(dòng)物免疫時(shí)間限制生產(chǎn)抗體。只要管理和培養(yǎng)技術(shù)正確,抗體就可無(wú)限的產(chǎn)生。基本過(guò)程是動(dòng)物免疫、細(xì)胞融合、克隆篩選、單克隆抗體性質(zhì)鑒定、腹水誘發(fā)、收集和純化等。


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