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細胞復(fù)蘇:
1、將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
2、在000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
細胞凍存:
待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞 凍存保種
1、棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗-2次,加入mL 0.25%(T25瓶)
2、-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
3、將細胞懸液000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加ml凍存液重懸細胞;
4、將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
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