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PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))過程常用試劑介紹

時(shí)間:2024/10/21閱讀:322
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PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中的技術(shù),下面是在PCR反應(yīng)過程中常用的試劑和設(shè)備:

試劑:

1、模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;

2、引物:PCR反應(yīng)的兩個(gè)引物,分別與模板DNA的兩端配對(duì)擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;

3、dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;

4、Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;

5、PCR buffer溶液:對(duì)PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;

6、酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測(cè)序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。

7、MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來判別DNA片段大小的工具。

8、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;



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