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當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>小鼠白介素ELISA試劑盒檢測夾心法操作步驟
ELISA檢測夾心法針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。
夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:
1、將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
2、 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結(jié)
3、 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結(jié)
4、 洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結(jié)
5、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果
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