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人抗紅細(xì)胞抗體,RBCELISA試劑盒
使用說明書elisa法測定
規(guī)格:48T/96T
本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測定人尿液或其它相關(guān)生物液體指標(biāo)的含量。
實(shí)驗(yàn)原理 用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
人抗磷脂酰絲氨酸抗體(APSA)
人抗磷壁酸抗體(TA)
人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)
人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)
人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)
人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)
人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)
人抗核仁抗體(ANA)
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)
Human anti-macrophage antibody
Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab
Human anti-red cell antibody
Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP
Human anti-nucleolus antibody,ANA
Human Anti-glucoprotein 210,GP210
Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1
Human alveoli basement membrane zone antibody,ABM-Ab
Human anti-thymocyte globulin,ATG
Human epidermal basement membrane zone,EBMZ
Human anti-centrol and centrosome antibody,ACA
人抗紅細(xì)胞抗體,RBCELISA試劑盒 試劑盒組成及試劑配制
1.試劑盒保存:-20℃(較長時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為50 U/L,做系列倍比稀釋后,分別稀釋50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,1.56 U/L,0.78 U/L,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 U/L,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制25 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)50 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
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