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生物科研標(biāo)準(zhǔn)品
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進(jìn)口測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明
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進(jìn)口ELISA試劑盒抗HBe的檢測(cè)一般采用法

時(shí)間:2018/10/15閱讀:244
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進(jìn)口ELISA試劑盒抗HBe的檢測(cè)一般采用此法

 每次實(shí)驗(yàn)均應(yīng)做陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照及空白對(duì)照(以PBS代替標(biāo)本),后者為本底值,在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)扣除本底值,陽(yáng)性對(duì)照<陰性對(duì)照<空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)成立。

一般認(rèn)為小分子抗原宜用本法檢測(cè),而大分子抗原則宜采用夾心法檢測(cè),但具體宜采用哪種方法應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)決定,本發(fā)與夾心法相比在操作上減少一步。包被抗體與酶標(biāo)抗體如果分別采用單克隆抗體和多克隆抗體時(shí),宜用單克隆抗體作為包被抗體,以多克隆抗體作為酶標(biāo)抗體。

 以酶標(biāo)記抗原的方法同酶標(biāo)記抗體。

當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,因此陽(yáng)性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,可采用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后加入抗原,形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質(zhì),然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體有多種模式,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,洗滌后再加入酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)




 

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