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進(jìn)口ELISA試劑盒代測(cè)常見(jiàn)問(wèn)題分析

時(shí)間:2018/4/20閱讀:113
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進(jìn)口ELISA試劑盒代測(cè)常見(jiàn)問(wèn)題分析
1.如何測(cè)定引物的OD值? 
用紫外分光光度計(jì)在260nm波長(zhǎng)測(cè)定溶液的吸光度來(lái)定量,請(qǐng)注意紫外分光光度計(jì)的使用,測(cè)定時(shí)溶液的吸光度稀釋到0.2-0.8之間(吸光度太高或太低會(huì)有較大的誤差)。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后,取部分溶液稀釋到1ml并在1ml標(biāo)準(zhǔn)比色皿中測(cè)定其吸光度,即為所測(cè)體積的OD值,進(jìn)而可以計(jì)算出母液的OD值。 
舉例:您拿到一管干粉的DNA,用1ml水溶解成母液,取該母液50μL稀釋成1ml并在1ml標(biāo)準(zhǔn)比色杯中測(cè)定的吸光度為0.25,說(shuō)明該50μL中含有0.25OD的DNA,也即說(shuō)明原來(lái)1ml母液中含有5OD的DNA。 
2.怎樣溶解引物? 
我們的的合成報(bào)告單給出了每OD引物稀釋為100μmoL/L(即100pmol/ul)濃度的加水量,您可以根椐您的實(shí)驗(yàn)需要加入適量的無(wú)核酸酶的雙蒸水(PH>6.0)或TE緩沖液(PH 7.5-8.0),開(kāi)啟瓶蓋溶解之前在3000-4000轉(zhuǎn)/分鐘 的轉(zhuǎn)速下離心1分鐘,防止開(kāi)蓋時(shí)引物散失。 
3.合成的引物應(yīng)如何保存?
沒(méi)有溶解的引物非常穩(wěn)定,可以在-20℃下保存至少1年,溶解好的引物可以事先稀釋為100μmoL/L的儲(chǔ)存液,分裝數(shù)份保存于-20℃冰箱,可以保存至少半年以上(反復(fù)多次凍融會(huì)降低使用壽命)。使用前,將濃溶液稀釋成工作液(10 pmol/ml或20 pmol/ml)后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 
4.如何檢測(cè)引物的純度? 
實(shí)驗(yàn)室方便的作法是用PAGE方法。使用加有7M尿素的一定濃度的聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳,<12個(gè)堿基的引物用20%的膠,12-60個(gè)堿基的引物用16%的膠,>60個(gè)堿基的引物用12%的膠,取0.2OD左右的引物,用尿素飽和液溶解或引物溶液中加入尿素干粉直到飽和,上樣前加熱變性(95oC,2mins)。加入尿素的目的一是變性,二是增加樣品比重,容易加樣。600V電壓進(jìn)行電泳,一定時(shí)間后(約2-3小時(shí)),剝膠,用熒光TLC板在紫外燈下檢測(cè)帶型,在主帶之下沒(méi)有雜帶,說(shuō)明純度是好的(有時(shí)由于變性不充分,主帶之上可能會(huì)有條帶,乃是引物二級(jí)結(jié)構(gòu)條帶)。 
5.一般的合成的引物在5"和3"末端有磷酸基團(tuán)嗎?
進(jìn)口ELISA試劑盒代測(cè)脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)ELISA試劑盒    ,英文名:    DOHH ELISA Kit
脫氧輔蛋白合酶(DHPS)ELISA試劑盒    ,英文名:    DHPS ELISA Kit
脫氧吡啶酚(DPD)ELISA試劑盒    ,英文名:    DPD ELISA Kit
脫氧胞苷激酶(DCK)ELISA試劑盒    ,英文名:    DCK ELISA Kit
脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apoTf)ELISA試劑盒    ,英文名:    apoTf ELISA Kit
褪黑素受體1B(MTNR1B)ELISA試劑盒    ,英文名:    MTNR1B ELISA Kit
褪黑素受體1A(MTNR1A)ELISA試劑盒    ,英文名:    MTNR1A ELISA Kit
突觸足蛋白(SYNPO)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYNPO ELISA Kit
突觸素(SYP)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYP ELISA Kit
突觸伸蛋白2(SYNJ2)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYNJ2 ELISA Kit
突觸伸蛋白1(SYNJ1)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYNJ1 ELISA Kit
突觸融合蛋白8(STX8)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX8 ELISA Kit
突觸融合蛋白7(STX7)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX7 ELISA Kit
突觸融合蛋白6(STX6)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX6 ELISA Kit
突觸融合蛋白5(STX5)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX5 ELISA Kit
突觸融合蛋白4(STX4)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX4 ELISA Kit
突觸融合蛋白3(STX3)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX3 ELISA Kit
突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX2 ELISA Kit
突觸融合蛋白1B(STX1B)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX1B ELISA Kit
突觸融合蛋白1A(STX1A)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX1A ELISA Kit
突觸融合蛋白19(STX19)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX19 ELISA Kit
突觸融合蛋白18(STX18)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX18 ELISA Kit
突觸融合蛋白17(STX17)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX17 ELISA Kit
突觸融合蛋白16(STX16)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX16 ELISA Kit
突觸融合蛋白12(STX12)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX12 ELISA Kit
突觸融合蛋白11(STX11)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX11 ELISA Kit
突觸融合蛋白10(STX10)ELISA試劑盒    ,英文名:    STX10 ELISA Kit
突觸囊泡蛋白樣蛋白2(SYTL2)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYTL2 ELISA Kit
突觸囊泡蛋白Ⅻ(SYT12)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYT12 ELISA Kit
突觸囊泡蛋白Ⅺ(SYT11)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYT11 ELISA Kit
突觸囊泡蛋白ⅩⅦ(SYT17)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYT17 ELISA Kit
突觸囊泡蛋白ⅩⅥ(SYT16)ELISA試劑盒    ,英文名:    SYT16 ELISA Kit進(jìn)口ELISA試劑盒代測(cè)

 

 

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