進口TSZ ELISA試劑盒酵母質(zhì)粒提取可以用試劑盒提取，也可以直接用裂壁酶處理后采用堿裂解法提取質(zhì)粒，缺點就是提取的量很少，還會容易出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，明明有卻條帶，檢測卻不正確。下面給大家介紹一種酵母質(zhì)粒提取方法及詳細步驟。
1. 接種單菌落(待檢測酵母細胞)于25mLYNB(補加氨基酸 營養(yǎng)物)培養(yǎng)基中，30℃振蕩培養(yǎng)大約24h。
2.第二天取一滴菌液于進行顯微鏡下觀察,目鏡用16,物鏡用40倍觀察細胞壁破碎前的狀態(tài),其成桿狀,流動性比較下.
3.取10ml的培養(yǎng)酵母菌液,5000g離心3min,棄上清液.加入5ml的1倍TE懸浮.
4.將懸浮液倒入高壓破壁儀的樣品管中,利用高壓破碎機進行破碎細胞壁,壓力加到20Mpa,停留15s,降壓,反復(fù)來回壓3次.取出細胞液,取一滴于顯微鏡下觀察,如果細胞呈不規(guī)則的球狀時,而且其流動性 比較大,說明其細胞壁已經(jīng)破碎成為原生質(zhì)體.
5.取2個EP管,每管加入1.5ml上述的細胞液,12000g離心5min,收集原生質(zhì)體.棄取上清液,每管加入300ul10%的SDS溶液,混勻冰浴5min,進行破原生質(zhì)體.
6.然后加入150ul的tris飽和酚,和150ul的鹵仿混合液(鹵仿:=24:1),混勻,12000g,離心10min.
7.將水相移到另一EP管中,加入等體積的鹵仿混合液(鹵仿:=24:1), 混勻,12000g,離心10min.
8. 將水相移到另一EP管中,加入1/10體積的3M KAC溶液和2倍體積的無水乙醇,放入-20℃冰箱中
9.1h,12000g離心10min,倒出乙醇,等干燥后加入1ml的70%的無水乙醇,混勻,12000g,離心10min.
10.棄去乙醇,等室溫干燥后,每管加入20ul的TE溶液(如要去處RNA酶,加入1ul的100mg/ml濃度的RNA酶),放入-20℃冰箱即可.
11.跑電泳進行檢測是否從酵母菌中提出質(zhì)粒了.進口TSZ ELISA試劑盒
Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA KIT    產(chǎn)品別名：    豚鼠白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒
Guinea pig interleukin 10,IL-10 ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠白介素10(IL-10)檢測試劑盒
Guinea Pig Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠白介素1(IL-1)檢測試劑盒
Guinea Pig Albumin ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠白蛋白檢測試劑盒
guinea pig Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒
Guinea Pig Interferon α,IFN-α ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒
Guinea pig Substance P,SP ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒
Guinea pig KL-6 (Krebs yon den Lundgen-6) ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠Ⅱ型肺泡細胞表面抗原(KL-6)檢測試劑盒
Guinea pig 25-hydroxy vitamin D3,25 HVD3 ELISA kit    產(chǎn)品別名：    豚鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)檢測試劑盒
    產(chǎn)品別名：    兔ELSIA試劑盒
Rabbit Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔組織因子途徑抑制物(TFPI)檢測試劑盒
Rabbit Tissue factor,TF ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子組織因子(TF)檢測試劑盒
Rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒
Rabbit Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子組織多肽抗原(TPA)檢測試劑盒
Rabbit Histamine,HIS ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子組胺(HIS)檢測試劑盒
Rabbit total alkaline phosphatase,TALP ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子總堿性磷酸酶(TALP)檢測試劑盒
Rabbit Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒
Rabbit TRAIL-R3 ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)檢測試劑盒
Rabbit Tumor necrosis factor α,TNFα ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)檢測試劑盒
Rabbit neutrophil elastase ELISA Kit    產(chǎn)品別名：    兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)檢測試劑盒 進口TSZ ELISA試劑盒