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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>microRNAs的作用機(jī)理
ELISA試劑盒miRNA基因通常是在核內(nèi)由RNA聚合酶II(polII)轉(zhuǎn)錄的,zui初產(chǎn)物為大的具有帽子結(jié)構(gòu)(7MGpppG)和多聚腺苷酸尾巴(AAAAA)的pre-miRNA。pre-miRNA在核酸酶Drosha和其輔助因子Pasha的作用下被處理成70個(gè)核苷酸組成的pre-miRNA。RAN–GTP和exportin 5將pre-miRNA輸送到細(xì)胞質(zhì)中。隨后,另一個(gè)核酸酶Dicer將其剪切產(chǎn)生約為22個(gè)核苷酸長度的miRNA:miRNA*雙鏈。這種雙鏈很快被引導(dǎo)進(jìn)入沉默復(fù)合體(RISC)復(fù)合體中,其中一條成熟的單鏈miRNA保留在這一復(fù)合體中。成熟的miRNA結(jié)合到與其互補(bǔ)的mRNA的位點(diǎn)通過堿基配對調(diào)控基因表達(dá)。
與靶mRNA不*互補(bǔ)的miRNA在蛋白質(zhì)翻譯水平上抑制其表達(dá)(哺乳動(dòng)物中比較普遍)。然而,zui近也有證據(jù)表明,這些miRNA也有可能影響mRNA的穩(wěn)定性。使用這種機(jī)制的miRNA結(jié)合位點(diǎn)通常在mRNA的3’端非翻譯區(qū)。如果miRNA與靶位點(diǎn)*互補(bǔ)(或者幾乎*互補(bǔ)),那么這些miRNA的結(jié)合往往引起靶mRNA的降解(在植物中比較常見)。通過這種機(jī)制作用的miRNAs的結(jié)合位點(diǎn)通常都在mRNA的編碼區(qū)或開放閱讀框中。每個(gè)miRNA可以有多個(gè)靶基因,而幾個(gè)miRNAs也可以調(diào)節(jié)同一個(gè)基因。這種復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)既可以通過一個(gè)miRNA來調(diào)控多個(gè)基因的表達(dá),也可以通過幾個(gè)miRNAs的組合來精細(xì)調(diào)控某個(gè)基因的表達(dá)。隨著miRNA調(diào)控基因表達(dá)的研究的逐步深入,將幫助我們理解高等真核生物的基因組的復(fù)雜性和復(fù)雜的基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
目前只有一小部分miRNAs生物學(xué)功能得到闡明。這些miRNAs調(diào)節(jié)了細(xì)胞生長,組織分化,因而與生命過程中發(fā)育、疾病有關(guān)。通過對基因組上miRNA的位點(diǎn)分析,顯示其在發(fā)育和疾病中起了非常重要的作用。一系列的研究表明:miRNAs在細(xì)胞生長和凋亡,血細(xì)胞分化,同源異形盒基因調(diào)節(jié),神經(jīng)元的極性,胰島素分泌,大腦形態(tài)形成,心臟發(fā)生,胚胎后期發(fā)育等過程中發(fā)揮重要作用。例如,miR-273和lys-6編碼的miRNA,參與線蟲的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程;miR-430參與斑馬魚的大腦發(fā)育;miR-181控制哺乳動(dòng)物血細(xì)胞分化為B細(xì)胞;miR-375調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物胰島細(xì)胞發(fā)育和胰島素分泌;miR-143在脂肪細(xì)胞分化起作用;miR-196參與了哺乳動(dòng)物四肢形成,miR-1與心臟發(fā)育有關(guān)。另有研究人員發(fā)現(xiàn)許多神經(jīng)系統(tǒng)的miRNAs在大腦皮層培養(yǎng)中受到時(shí)序調(diào)節(jié),表明其可能控制著區(qū)域化的mRNA翻譯。對于新的miRNA基因的分析,可能發(fā)現(xiàn)新的參與器官形成、胚胎發(fā)育和生長的調(diào)節(jié)因子,促進(jìn)對癌癥等人類疾病發(fā)病機(jī)制的理解。
miRNA在細(xì)胞分化,生物發(fā)育及疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮巨大作用,越來越多的引起研究人員的關(guān)注。隨著對于miRNA作用機(jī)理的進(jìn)一步的深入研究,以及利用的例如miRNA芯片等高通量的技術(shù)手段對于miRNA和疾病之間的關(guān)系進(jìn)行研究,將會(huì)使人們對于高等真核生物基因表達(dá)調(diào)控的網(wǎng)絡(luò)理解提高到一個(gè)新的水平。這也將使miRNA可能成為疾病診斷的新的生物學(xué)標(biāo)記,還可能使得這一分子成為藥靶,或是模擬這一分子進(jìn)行新藥,這將可能會(huì)給人類疾病的治療提供一種新的手段。
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