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生物樣品常溫保存的方式

時(shí)間:2015/7/1閱讀:317
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ELISA試劑盒福爾馬林固定石蠟包埋(formalin-fixed paraffin embedded, FFPE)是對動物組織及其所包含的生物大分子進(jìn)行常溫保存的較常用的方法。福爾馬林的有效成分甲醛含有羰基基團(tuán),極性較強(qiáng),化學(xué)與生物學(xué)活性強(qiáng)。它可使生物大分子發(fā)生交聯(lián),加上后續(xù)的脫水步驟,整個過程破壞了引起核酸和蛋白等大分子降解的酶類的活性,因而被包埋的組織可以在常溫下保存。FFPE處理的樣品組織與細(xì)胞的形態(tài)學(xué)保持效果很好,多用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)的組織病理學(xué)診斷和免疫組織化學(xué)檢測。在研究中也用于顯色原位雜交或熒光原位雜交。 FFPE包塊在常溫下可長時(shí)間保存,有的數(shù)十年后仍有使用價(jià)值。ELISA試劑盒用這種方法保存核酸,得率不高,且片段化和交聯(lián)現(xiàn)象較嚴(yán)重。收獲的DNA一般長度不多于400bp,RNA長度不多于200bp。但也能滿足某些PCR、RT PCR或基因芯片雜交的要求。
 
ELISA試劑盒由于福爾馬林有致癌性,且容易使核酸片段化,人們開發(fā)出一些福爾馬林替代物用于組織的固定。經(jīng)這些替代物固定后石蠟包埋的組織,收獲的核酸長度可達(dá)數(shù)千bp。

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