DIY夾心法ELISA試劑盒常見(jiàn)技術(shù)指南：
1、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)；若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對(duì)。
2、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測(cè)抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。ELISA試劑盒同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度，建議過(guò)夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
6、若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
7、當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1    半乳糖凝集素1抗體
HLTF    解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子抗體
HMGCS2    三羥基*基輔酶A合成酶2抗體
HLA Class 1 ABC    人類白細(xì)胞抗原A抗體
HSD17B2    羥類固醇脫氫酶17β2抗體
HSD17B1    羥類固醇脫氫酶17β-HSD抗體
Hepatocyte(2H5)    人肝細(xì)胞單克隆抗體/肝細(xì)胞特異性抗原抗體
His tag(2D5)    小鼠抗聚組氨酸單克隆抗體
Hepcidin-25    鐵調(diào)節(jié)蛋白/鐵調(diào)素抗體
HSJ1    熱休克蛋白J1抗體
Hes5    發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子-5抗體
Phospho-HSP90 alpha (Thr5 + Thr7)    磷酸化熱休克蛋白90α抗體
Phospho-Histone H2A.X (Ser139)    磷酸化組蛋白H2AX抗體
Phospho-Histone H3 (Ser28)    磷酸化組蛋白H3抗體
Phospho-Histone H3 (Thr11)    磷酸化組蛋白H3抗體
Phospho-Histone H3 (Thr3)    磷酸化組蛋白H3抗體
HDAC5    組蛋白去乙?；?抗體
H5N1 Hemagglutinin    A型流感病毒H5N1凝集素
HCMV UL49    人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體
HNF1 beta    肝細(xì)胞核因子1β/HNF-1β抗體
HHLA3    HHLA3蛋白抗體
HHIPL2    HHIP樣蛋白2抗體
H3N2 Matrix Protein 2    A型流感病毒H3N2-M2蛋白抗體
HSH2D    HSH2D抗體
Hirudin    水蛭素抗體