ELISA試劑盒對(duì)于植物病毒材料的固定，丙酮用得zui多，乙醇次之。因?yàn)楸獙?duì)病毒的抗原性損害為zui小，但對(duì)于那些不穩(wěn)定的病毒，則應(yīng)避免固定。

   在應(yīng)用免疫酶技術(shù)時(shí)，固定處理對(duì)酶的活性的影響也得心中有數(shù)。許多固定劑對(duì)抗原的活性都 會(huì)有所損害，例如，福爾馬林對(duì)蛋白抗原的固定造成抗原性的破壞非常明顯。因此，對(duì)福爾馬林的使用必須嚴(yán)格控制濃度，一般使用的福爾馬林濃度為10%，盡管如此，對(duì)抗原的抗原性還是有損害，所以必須進(jìn)行抗原修復(fù)。

 ELISA試劑盒另外，對(duì)于堿性磷酸酶，在4℃下，丙酮固定一晝夜，能喪失30%的活性，如用丙酮固定后包埋，則喪失70%的活性；在4℃下，福爾馬林固定2－4h，則喪失25%的活性。

   固定條件對(duì)標(biāo)本的固定效果作用較大。

   固定劑濃度：丙酮zui常用的是100%；乙醇zui常用95%，但是70%乙醇的固定力為zui強(qiáng)；福爾馬林常用10%。

   固定的溫度：一般而言，固定作用隨溫度升高而加強(qiáng)，ELISA試劑盒室溫是zui常用的。固定溫度可以－70－30℃。應(yīng)根據(jù)不同的抗原使用不同的溫度，麻疹病毒應(yīng)在－20－40℃用丙酮固定30min，而酶可以37℃用乙醇固定15min.

   固定液的pH：一般以所用固定劑的pH為準(zhǔn)，但若以酶去除某些抗原表面的蛋白衣膜時(shí)，應(yīng)根據(jù)所用酶的性質(zhì)調(diào)節(jié)pH。