avav588con,最近2019中文免费字幕在线观看,欧美一道本一区二区三区,九九热在线观看,经典好看免费AV

行業(yè)產(chǎn)品

  • 行業(yè)產(chǎn)品

上海研晶生化試劑有限公司


當(dāng)前位置：上海研晶生化試劑有限公司>資料下載>Ultrasense® ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒使用說明書

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：200條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：趙誠

資料下載

Ultrasense® ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒使用說明書

閱讀：2818發(fā)布時(shí)間：2011-09-21

  • 提供商

    上海研晶生化試劑有限公司

  • 資料大小

    6.9KB

  • 資料圖片

    查看

  • 下載次數(shù)

    38次

  • 資料類型

    JPG 圖片

  • 瀏覽次數(shù)

    2818次

  • 免費(fèi)下載

    點(diǎn)擊下載


產(chǎn) 品
名   稱
規(guī) 格
試劑A
發(fā)光劑/增強(qiáng)劑溶液
25ml
試劑B
過氧化物緩沖液
25ml

組成：
 
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：ECL化學(xué)發(fā)光底物是免疫印跡實(shí)驗(yàn)中與辣根過氧化物酶（HRP）配套使用的高靈敏度檢測(cè)試劑。本品在HRP的催化下發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，用于檢測(cè)固定在PVCF膜上的蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子，能夠檢測(cè)到10-15g水平的抗原；發(fā)出的光強(qiáng)度強(qiáng)烈而持久，可以用照相技術(shù)（X-光膠片曝光）、凝膠成像儀等方法顯示、檢測(cè)。
保存條件： -4℃避光保存，保質(zhì)期二年。
操作步驟：
1. 按照常規(guī)細(xì)胞破膜、提取蛋白、電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針孵育后，充分洗滌印跡膜。
2. 根據(jù)需要量，新鮮配制發(fā)光工作液：取等體積的A 溶液B溶液混合均勻，立即使用。
3. 從洗滌液中取出印跡膜，在濾紙上瀝凈洗滌液。將膜浸入發(fā)光工作液中，并與之充分接觸。室溫孵育 2—5分鐘。
4. 從發(fā)光液中取出印跡膜，用濾紙瀝去多余的發(fā)光工作液。
5. 在 X-光膠片暗盒內(nèi)面鋪一張面積大于印跡膜的塑料保鮮膜。將雜交膜緊貼保鮮膜，去除氣泡和皺褶。
6. 在暗室內(nèi)將印跡膜壓在X-光膠片上，曝光不同的時(shí)間，如數(shù)秒到數(shù)十分鐘。顯影沖洗。
注意事項(xiàng)：
1. 為獲得*實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，包括檢測(cè)樣品的用量、一抗、二抗稀釋度以及雜交膜及封閉試劑的選擇；建議一抗的工作濃度為50ng/ml—1μg/ml，二抗為5ng/ml—50ng g/ml。
2.由于牛奶中含有內(nèi)源性*，在使用親和素/*系統(tǒng)時(shí)，封閉液中請(qǐng)避免使用奶粉；
3.在封閉緩沖液及所有抗體稀釋液中加入高質(zhì)量的吐溫-20 （終濃度為0.05 ％），以減
少非特異性結(jié)合；
4.由于疊氮鈉是HRP抑制劑，在緩沖液中避免使用疊氮鈉作為防腐劑；
5.整個(gè)免疫印跡實(shí)驗(yàn)過程請(qǐng)確保印跡膜始終處于濕潤(rùn)狀態(tài)，避免干燥；
6.為獲得*實(shí)驗(yàn)效果，抗體孵育及膜洗滌步驟中請(qǐng)使用搖床輔助完成；
7.避光條件下，配制好的化學(xué)發(fā)光工作液在室溫下可穩(wěn)定8小時(shí)。陽光或其他強(qiáng)光會(huì)影響工作液的效果。為獲得*效果，可于棕色瓶中配制工作液。正常實(shí)驗(yàn)室燈光短時(shí)間照射不影響工作液的使用。
8.蛋白過量或長(zhǎng)時(shí)間曝光，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化而失去線性關(guān)系。曝光不足則使條帶模糊。
9.發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光。高豐度蛋白條帶發(fā)光較強(qiáng)，在暗房中肉眼可見。低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱，肉眼不可見，但可使X光膠片曝光。因而不能以肉眼觀察結(jié)果判斷發(fā)光時(shí)間。有時(shí)候弱帶需要曝光1—10小時(shí)。如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，重新ECL發(fā)光和曝光。
10. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時(shí)會(huì)使熒光淬滅，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜。
 可能出現(xiàn)的問題及解決方法：

問題
可能原因
解決方法
膠片反相（白色條帶，黑色背景）
 
 
系統(tǒng)中HRP過量
 
 
稀釋HRP標(biāo)記物至少10倍以上
膜上出現(xiàn)棕色或黃色條帶
暗室中看到強(qiáng)烈發(fā)光
發(fā)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間過短
 
 
信號(hào)較弱或者無信號(hào)
發(fā)光反應(yīng)系統(tǒng)中HRP過多，消耗底物過快，引起信號(hào)迅速降低
稀釋HRP標(biāo)記物至少10倍以上
抗原/抗體量不夠
增加抗原/抗體使用量
蛋白轉(zhuǎn)移率低
優(yōu)化轉(zhuǎn)移系統(tǒng)
 
 
 
高背景
系統(tǒng)中HRP過量
稀釋HRP標(biāo)記物至少10倍以上
封閉不足
優(yōu)化封閉程序
封閉試劑選擇不當(dāng)
選擇另一種封閉試劑
沖洗不充分
增加沖洗時(shí)間，次數(shù)
曝光過度
減少曝光時(shí)間
抗原/抗體濃度過高
降低抗原/抗體使用濃度
 
蛋白條帶為點(diǎn)狀
蛋白轉(zhuǎn)移失敗
優(yōu)化轉(zhuǎn)移過程
膜未平衡
按照說明書處理膜
X-光膠片與膜之間有氣泡
曝光前去除所有氣泡
出現(xiàn)非特異條帶（信號(hào)維持時(shí)間較短，高背景）
系統(tǒng)中HRP過多
稀釋HRP標(biāo)記物
出現(xiàn)非特異條帶（信號(hào)維持時(shí)間正常，背景干凈）
一抗用量過多
進(jìn)一步稀釋一抗
SDS導(dǎo)致非特異結(jié)合
在實(shí)驗(yàn)過程中避免使用SDS

 

智慧城市網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.duty-free.cn,All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，智慧城市網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~