細(xì)胞名稱 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞；95-D

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 這是一株高轉(zhuǎn)移肺癌。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 PN

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:12；D13S317:12；D16S539:13；D18S51:14；D19S433:13,15.2；D21S11:29；D2S1338:18；D3S1358:16；D5S818:11；D7S820:9,11；D8S1179:13,15；FGA:19；TH01:7；TPOX:9,11；vWA:18

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

Anti-Nadrin  Dysbindin抗體 500毫升 成一號瓊脂培養(yǎng)基 放線菌培養(yǎng)

Anti-ECP  嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗體 300克 XM-G Agar XM-G瓊脂培養(yǎng)基

Anti-ED-1  外胚層發(fā)育不良抗體 20支 半固體瓊脂發(fā)酵管 半固體瓊脂發(fā)酵管 BR

Anti-EDNRA  內(nèi)皮素受體A抗體 20支 衛(wèi)矛醇半固體發(fā)酵管 衛(wèi)矛醇半固體發(fā)酵管 BR

Anti-EEF2  真核翻譯延長因子2抗體 20支 V-P半固體瓊脂發(fā)酵管 V-P半固體瓊脂發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EEF2 (Thr56)  磷酸化真核翻譯延長因子2抗體 20支 3% NaC1V-P半固體發(fā)酵管 3% NaC1V-P半固體發(fā)酵管 BR

Anti-EEF2k  真核延伸因子激酶2抗體 20支 Korser氏肉湯發(fā)酵管 Korser氏肉湯發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EEF2k (Ser366)  磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 20支 丙二酸鹽發(fā)酵管 丙二酸鹽發(fā)酵管 BR

Anti-EGFR  表皮生長因子受體抗體 20支 西蒙氏枸櫞酸鹽發(fā)酵管 西蒙氏枸櫞酸鹽發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 20支 蛋白胨水(色氨酸肉湯)發(fā)酵管 蛋白胨水(色氨酸肉湯)發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EGFR(Thr669)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 20支 無鹽胰胨水發(fā)酵管 無鹽胰胨水發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EGFR(Tyr1045)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 20支 3% NaC1胰胨水發(fā)酵管 3% NaC1胰胨水發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EGFR(Tyr1086)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 20支 7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 BR

Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 20支 10% NaC1胰胨水發(fā)酵管

瓊脂糖Ⅰ型,片劑 AGAROSE I TABLETS, 500MG 9012-36-6 100 Tablets 超純級

瓊脂糖Ⅰ型,片劑 AGAROSE I TABLETS, 500 MG 超純級

瓊脂糖Ⅰ型,片劑 AGAROSE I TABLETS, 500 MG 25Tablets 超純級

瓊脂糖Ⅰ型,片劑 AGAROSE I TABLETS, 500 MG 50Tablets 超純級

瓊脂糖Ⅰ型,片劑 AGAROSE I TABLETS, 500 MG 5Tablets 超純級

Tris-醋酸-SDS電泳緩沖液 TRIS-ACETATE-SDS BUFFER, 10X 500ML 超純級

TBS片 TBS TABLETS 100 Tablets 超純級

TBS片 TBS TABLETS 200 Tablets 超純級

CAPS, 轉(zhuǎn)移緩沖液 10X CAPS TRANSFER BUFFER, 10X 500ML 蛋白組學(xué)級

TBS 吐溫 20 緩沖液, 20X TBS / TWEEN 20 BUFFER, 20X 500ML 生物技術(shù)級

PBS, 吐溫 20 緩沖液, 20X PBS / TWEEN 20 BUFFER, 20X 500ML 生物技術(shù)級

蛋白Marker LOW RANGE PROTEIN MW MARKER 200 µl 生物技術(shù)級

中電滲瓊脂糖 AGAROSE, MODERATE EEO 100G 生物技術(shù)級

中電滲瓊脂糖 AGAROSE, MODERATE EEO 25G 生物技術(shù)級

人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞；95-D高電滲瓊脂糖 AGAROSE, HIGH EEO 100G 生物技術(shù)級

高電滲瓊脂糖 AGAROSE, HIGH EEO 25G 生物技術(shù)級

超高電滲瓊脂糖 AGAROSE, VERY HIGH EEO 100G 生物技術(shù)級

超高電滲瓊脂糖 AGAROSE, VERY HIGH EEO 25G 生物技術(shù)級

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。