細(xì)胞名稱 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞；769-P

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 這株細(xì)胞來源于原發(fā)性透明細(xì)胞腺癌。細(xì)胞呈邊界不清楚的球形，高核質(zhì)比，有微絨毛和橋粒?？梢栽谲洯傊猩L。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 P(25+5)

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

Anti-GAPDH(human)/FITC  熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗體IgG

Anti-GAPDH(rat、mouse)/FITC  熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油醛脫氫酶（大鼠、小鼠）抗體IgG

Anti-GAPDH/FITC  熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油醛脫氫酶IgG

Anti-GAPDH/FITC  熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體IgG

Anti-Gastrin/FITC  熒光素標(biāo)記胃泌素/蛙皮素抗體IgG

Anti-Gastrin/FITC  熒光素標(biāo)記胃泌素/蛙皮素抗體IgG

Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC  熒光素標(biāo)記蛙皮素受體3抗體IgG

Anti-GATA-3/FITC  熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白3抗體IgG

Anti-GATA-4/FITC  熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白4抗體IgG

Anti-GATA-5/FITC  熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白5抗體IgG

Anti-GATA-6/FITC  熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6抗體IgG

Anti-Gax/FITC  熒光素標(biāo)記生長終止特異性同源盒基因抗體IgG

Anti-GCK/FITC  熒光素標(biāo)記抗葡萄糖激酶抗體IgG

Anti-GCN2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白激酶GCN2蛋白抗體IgG

Anti-Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體IgG

Anti-phospho-GCN2 (Thr667) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體IgG

Anti-GCS/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體IgG

Anti-CSF3/FITC  熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體IgG

Anti-G-CSFR/CSF3R/CD114/FITC  熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3受體抗體IgG

Anti-phosphoM-CSF Receptor(Tyr708) /FITC  熒光素標(biāo)記

97%

七葉皂苷B（IB) Escin IB；Aescin IB ≥95%

七葉皂苷C Escin IIA;Aescin IIA ≥95%

七葉皂苷D Escin IIB；AescinIIB ≥92%

漆黃素 butin (7, 3′, 4′-trihydroxydihydroflavone) ≥95%

齊墩果酸 Oleanolic Acid ≥95%

奇任醇 Kirenol ≥98%

千層紙素A Oroxylia A 95%

千金藤素 Cepharanthine 98%

羌活醇 Notopterol ≥95%

羥基紅花黃色素A Hydroxysafflor yellow A ≥94%

羥基積雪草苷 Madecassoside ≥90%

羥基積雪草酸 Madecassic acid ≥97%

羥基酪醇 hydroxytyrosol ≥97%

茄尼醇 Solanesol 98%

芹菜素 Apigenin ≥98%

秦皮苷 Fraxin ≥98%

秦皮甲素 Aesculin ≥98%

秦皮素 Fraxetin ≥98%

秦皮乙素 Aesculetin ≥98%

青蒿琥酯 Artesunate ≥98%

人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞；769-P青藤堿 Sinomenine ≥98%

氫溴東莨菪堿 Scopolamine Hydrobromide 97%

氫高烏甲素 LAPPACONITINE HYDROBROMIDE 98%

秋水仙堿 Colchicine ≥97%

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。