菠蘿蛋白酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒僅供研討運(yùn)用。
檢查規(guī)模：96T
2 IU/L -48 IU/L
運(yùn)用意圖：
本試劑盒用于測(cè)定植物安排，細(xì)胞及其它有關(guān)樣本中菠蘿蛋白酶（Bromelain）含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中菠蘿蛋白酶（Bromelain）水平。用純化的菠蘿蛋白酶（Bromelain）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次參加菠蘿蛋白酶（Bromelain），再與HRP符號(hào)的菠蘿蛋白酶（Bromelain）抗體，構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，通過(guò)*洗刷后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成終究的黃色。色彩的深淺和樣品中的菠蘿蛋白酶（Bromelain）呈正有關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)規(guī)范曲線核算樣品中菠蘿蛋白酶（Bromelain）濃度。
試劑盒構(gòu)成

標(biāo)本請(qǐng)求 
1．標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行獲取，獲取按有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，獲取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立刻進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保留，但應(yīng)防止重復(fù)凍融
2．不能檢查含NaN3的樣品，因NaN3按捺辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
菠蘿蛋白酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作過(guò)程
1. 規(guī)范品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰兑?guī)范品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2. 加樣：別離設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、規(guī)范孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上規(guī)范品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終究稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，悄悄晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗刷：當(dāng)心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗刷液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔參加酶標(biāo)試劑50μl，空白孔在外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗刷：操作同5。
9. 顯色：每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震動(dòng)混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反響（此刻藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 菠蘿蛋白酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加停止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。