一、分析方法分類
（一）終點(diǎn)法
被測(cè)物質(zhì)在反應(yīng)過(guò)程中*被轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物，即達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)，根據(jù)終點(diǎn)吸光度的大小求出被測(cè)物濃度，稱為終點(diǎn)法（end essay）。實(shí)際上被測(cè)物并沒有*被轉(zhuǎn)變，而只是與產(chǎn)物達(dá)到一個(gè)動(dòng)態(tài)的化學(xué)平衡，因此該法稱為平衡法更為恰當(dāng)。從時(shí)間-吸光度曲線來(lái)看，到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)或平衡點(diǎn)時(shí)，吸光度將不再變化。分析儀通常在反應(yīng)終點(diǎn)附近連續(xù)選擇兩個(gè)吸光度值，求出其平均值計(jì)算結(jié)果，并可根據(jù)兩點(diǎn)的吸光度差來(lái)判斷反應(yīng)是否到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)。終點(diǎn)法參數(shù)設(shè)置簡(jiǎn)單，反應(yīng)時(shí)間一般較長(zhǎng)，精密度較好。
終點(diǎn)時(shí)間的確定：①根據(jù)時(shí)間-吸光度曲線來(lái)確定，如Trinder反應(yīng)測(cè)定尿酸，反應(yīng)曲線上3～5min時(shí)其吸光度已趨向穩(wěn)定，因而可將5min作為反應(yīng)終點(diǎn)。②根據(jù)被測(cè)物反應(yīng)終點(diǎn)，結(jié)合干擾物的反應(yīng)情況來(lái)確定，如在血清白蛋白的溴甲酚綠法測(cè)定中，白蛋白與溴甲酚綠在10s內(nèi)很快完成反應(yīng)，之后α球蛋白和β球蛋白與溴甲酚綠發(fā)生 "慢反應(yīng)"，使反應(yīng)曲線上吸光度在10s后仍繼續(xù)緩慢上升，持續(xù)約達(dá)10min，因此終點(diǎn)時(shí)間應(yīng)采用10～30s，而不應(yīng)選擇10min。

（三）連續(xù)監(jiān)測(cè)法
連續(xù)監(jiān)測(cè)法（continuous monitoring essay）又稱速率法（rate essay），是在測(cè)定酶活性或用酶法測(cè)定代謝產(chǎn)物時(shí)，連續(xù)選取時(shí)間-吸光度曲線中線性期的吸光度值，并以此線性期的單位吸光度變化值（ΔA/min）計(jì)算結(jié)果，見圖7-7A和B。所謂線性期就是各點(diǎn)吸光度差值相等，如圖7-7C所示，圖中δ1及δ5值偏小，而δ2＝δ3＝δ4，故A1點(diǎn)至A4點(diǎn)屬線性段。此線性期對(duì)底物來(lái)說(shuō)屬零級(jí)反應(yīng)，期間的ΔA/min即為酶促反應(yīng)的初速度，其大小與被測(cè)酶活性成正比。連續(xù)監(jiān)測(cè)法的優(yōu)點(diǎn)即是可以確定線性期并計(jì)算ΔA/min，根據(jù)此值再準(zhǔn)確地計(jì)算酶活性，因而使自動(dòng)生化分析儀在酶活性測(cè)定方面顯著地優(yōu)于手工法。連續(xù)監(jiān)測(cè)法也可用于測(cè)定呈線性反應(yīng)的代謝物濃度，一般是某些基于酶法測(cè)定的代謝物。酶活性（U/L）＝ΔA/min×理論（或校準(zhǔn)）K值，代謝物濃度CU=ΔA/min×校準(zhǔn)K值。