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人鐵調(diào)素(Hepcidin)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

時(shí)間:2015-3-30閱讀:125
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人鐵調(diào)素(Hepcidin)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中鐵調(diào)素Hepcidin的含量。

實(shí)驗(yàn)原理:試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人鐵調(diào)素Hepcidin水平。用純化的人Hepcidin抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Hepcidin,再與HRP 標(biāo)記的鐵調(diào)素Hepcidin 抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Hepcidin 呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人鐵調(diào)素Hepcidin 濃度。

注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.
人鐵調(diào)素Hepcidin各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值為0.990 以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%

檢測范圍:7.5μg/L -150μg/L

保存條件及有效期:
1.
人鐵調(diào)素Hepcidin試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個(gè)月

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