胰蛋白酶活性測定說明

原理：胰蛋白酶能催化蛋白質(zhì)的水解，對于由堿性氨基酸（如精氨酸、賴氨酸）的羧基與其他氨基酸的氨基所形成的肽鍵具有高度的專一性。此外，胰蛋白酶也能催化由堿性氨基酸的羧基所形成的酰胺鍵和酯鍵，有高度的專一性仍表現(xiàn)為對堿性氨基酸羧基一側(cè)的選擇對此等化學(xué)鍵的催化水解活性的敏感度為：酯鍵＞酰胺鍵＞肽鍵。因此，可以利用含有這些化學(xué)鍵中任一種鍵型的底物來研究胰蛋白酶的專一催化活性。

在動物胰臟中，胰蛋白酶是以無活性的酶原狀態(tài)存在的。在生理?xiàng)l件下，胰蛋白酶原隨胰液分泌至十二指腸后，在小腸上腔有Ca2+的環(huán)境中，為腸激酶或胰蛋白酶所激活，其肽鏈N-端的賴氨酸與異亮氨酸之間的一個肽鍵被水解，失去一個酸性6肽，其分子構(gòu)象發(fā)生一定的改變后轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂写呋鞍踪|(zhì)水解活性的胰蛋白酶。

胰蛋白酶原分子量約為24000，其等電點(diǎn)為pH8.9；胰蛋白酶的分子量約為23400，其等電點(diǎn)為pH10.8。

胰蛋白酶在pH3.0時zui穩(wěn)定，其濃溶液可貯存于冰箱（0℃以下）數(shù)周而活性無顯著喪失。pH＜3時，胰蛋白酶易變性。PH＞５時，胰蛋白酶易自溶。胰蛋白酶催化活性的zui適pH為7.6～7.8。

重金屬離子、有機(jī)磷化合物和反應(yīng)產(chǎn)物都能抑制胰蛋白酶的活性。胰臟、卵清和大豆中也含有一些蛋白質(zhì)對胰蛋白酶活性具有抑制作用。

保存條件：

①胰蛋白酶底物粉劑：4℃保存條件下3個月內(nèi)有效

②胰蛋白酶底物稀釋液：4℃保存條件下3個月內(nèi)有效

③樣本勻漿介質(zhì)：4℃保存條件下6個月內(nèi)有效