PrimaCell™大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞試劑盒操作要點:

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

胰腺星狀細(xì)胞

胎盤羊膜細(xì)胞

胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞

胎盤絨毛膜細(xì)胞

臍帶單核細(xì)胞

胎兒表皮角化細(xì)胞

胎兒真皮成纖維細(xì)胞

臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞

臍靜脈平滑肌細(xì)胞

臍動脈平滑肌細(xì)胞

子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

子宮平滑肌細(xì)胞

子宮成纖維細(xì)胞

卵巢上皮細(xì)胞

卵巢成纖維細(xì)胞

卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞

乳腺上皮細(xì)胞

乳腺成纖維細(xì)胞

胰島β細(xì)胞

甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞