一、培養(yǎng)製備
1: 在室溫或37±2℃的溫度下解凍外周血染色體同步化套裝培養(yǎng)管或培養(yǎng)瓶。
2: 在無菌條件下添加0.5ml全血至一個(gè)試管中或分配5ml瓶裝的介質(zhì)到一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶中并加入樣本。
3: 蓋上培養(yǎng)管的蓋子。
4: 混合培養(yǎng)管（或培養(yǎng)瓶）中的物質(zhì)，水平放置（在它的平坦的表面上），并在37±2℃的溫度下溫育。沒有必要添加CO2, 因?yàn)樵摻橘|(zhì)的構(gòu)成就是為關(guān)閉系統(tǒng)中*的淋巴細(xì)胞擴(kuò)散而設(shè)計(jì)的。

二、培養(yǎng)同步化
1: 經(jīng)過48-72小時(shí)的培養(yǎng)后，添加0.1ml的溶液A并溫育一整夜。
2: 溫育后，添加0.1ml的溶液B并溫育5小時(shí)（沒有必要洗滌細(xì)胞）。
3: 添加20ul秋水仙素（10ug/ml），并在37±2℃的溫度下溫育60分鐘（大約）。如果要獲得更多數(shù)量的前中期分裂相，那可將溫育時(shí)間減少至15分鐘。

注意：經(jīng)過同步化處理的細(xì)胞，進(jìn)行G和R顯帶時(shí)，胰酶處理時(shí)間需要相應(yīng)延長(zhǎng)。

三、染色體固定和玻片製備
1: 溫育后，如有必要，將培養(yǎng)轉(zhuǎn)移至一個(gè)試管，并用離心機(jī)分離3-4分鐘，轉(zhuǎn)速為每分鐘2.000（更快的轉(zhuǎn)速不會(huì)損壞細(xì)胞）。
2: 倒掉上層清液，注意不要使細(xì)胞粒子松散（推薦留大約0.5ml的物質(zhì)在試管內(nèi)）。
3: 有力地重新懸掛粒子。
4: 添加5ml低滲液（滴入H2O、0.56%氯化鉀），并充分混合。
5: 在室溫下至少溫育7分鐘。
6: 用離心機(jī)分離3-4分鐘，轉(zhuǎn)速為每分鐘2.000。
7: 根據(jù)步驟2倒掉上層清液。
8: 有力地重新懸掛粒子。
9: 添加5ml Ibraimov溶液（滴入H2O、5%醋酸），并充分混合。
10: 立即用離心機(jī)分離3-4分鐘，轉(zhuǎn)速為每分鐘2.000。
11: 根據(jù)步驟2倒掉上層清液。
12: 有力地重新懸掛粒子。
13: 添加5ml固定液（甲醇:醋酸：3:1），并充分混合。
14: 重復(fù)步驟10-13。
15: 立即用離心機(jī)分離3-4分鐘，轉(zhuǎn)速為每分鐘2.000。
16: 仔細(xì)倒掉幾乎全部的上層清液。
17: 添加幾滴新準(zhǔn)備的固定劑，要考慮到滴數(shù)應(yīng)當(dāng)適合粒子內(nèi)的細(xì)胞濃度。
18: 滴一小滴細(xì)胞懸浮液到一塊干凈且濕潤(rùn)的顯微鏡玻片上。
19: 放進(jìn)Optichrome染色體分散儀（貨號(hào): EKAMH950）內(nèi)，在正確溫度和相對(duì)濕度的恒定條件下蒸發(fā)。