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論壇上關于ELISA試劑盒批發(fā)的討論帖子非常多,今天也發(fā)表一下自己的一些看法,對ELISA的見解有不對的地方,希望指正或者直接拍磚。如何靈活應用ELISA這個檢測方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理,大家都很清楚,網(wǎng)上的資料一大堆。可真正用起來的時候,有時候就有點犯糊涂,我談一下自己的理解。
ELISA試劑盒檢測方法簡述:
間接法測抗體:將特異性抗原包被在固相載體上,形成固相抗原,加入待檢標本(含相應抗體),其中抗體與固相抗原形成抗原-抗體復合物,再加入酶標記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體,亦稱二抗),與上述抗原-抗體復合物結合。此時加入底物,復合物上的酶則催化底物而顯色。
雙抗體夾心法測抗原:將已知的特異性抗體包被在固相載體上,形成固相抗體,加入待檢標本(含相應抗原),抗原與固相抗體結合成復合物,再加入特異性酶標抗體,使之與已形成的抗原-抗體復合物結合,當加入與酶相應的底物時,酶催化底而顯色,根據(jù)顏色的有無和顏色的深淺對待測抗原進行定性和定量。
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