我們今天所說的封閉是進(jìn)口原裝ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)步驟,而封閉的重要性是在于實(shí)驗(yàn)?zāi)J降模裉旌湍黄鹬攸c(diǎn)來看這個(gè)問題。
抗原或抗體包被時(shí)所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。
封閉劑:
1. zui常用的是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白。
2. 也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。
3. 脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,其zui大的特點(diǎn)是價(jià)廉,可以高濃度使用(5%)。
4. 高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作封閉劑使用,但由于奶粉的成份復(fù)雜,而且封閉后的載體不易長期保存,因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。
總結(jié):并非所有的ELISA固相均需封閉,封閉不當(dāng)反而會使陰性本底增高。
1. 一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌*,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。特別是用單抗腹水直接包被時(shí),因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類似封閉劑的作用。
2. 進(jìn)口原裝ELISA試劑盒在間接法測定中,封閉一般是不可少的。
磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15IgG 人肌酸激酶(CK)
磷酸化雄激素受體IgG 人肌生成素(MYOG)
磷酸化雄激素受體IgG 人肌球蛋白重鏈(MHC)
磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白IgG 人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)
磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白IgG 人肌球蛋白輕鏈(MLC)
磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2IgG 人肌球蛋白(MYS)
磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2IgG 人肌腱蛋白R(TN-R)
磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2IgG 人肌紅蛋白(MYO/MB)
磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2IgG 人肌鈣蛋白T(Tn-T)
磷酸化血管生成素受體2IgG 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
磷酸化血管生成素受體2IgG 人活化素A(ACV-A)
進(jìn)口原裝ELISA試劑盒