我們今天所說(shuō)的封閉是小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)步驟,而封閉的重要性是在于實(shí)驗(yàn)?zāi)J降?,抗原或抗體包被時(shí)所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。
封閉劑:
1. zui常用的是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白。
2. 也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。
3. 脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,其zui大的特點(diǎn)是價(jià)廉,可以高濃度使用(5%)。
4. 高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作封閉劑使用,但由于奶粉的成份復(fù)雜,而且封閉后的載體不易長(zhǎng)期保存,因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。
總結(jié):并非所有的ELISA固相均需封閉,封閉不當(dāng)反而會(huì)使陰性本底增高。
1. 一般說(shuō)來(lái),雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌*,不經(jīng)封閉也可得到滿(mǎn)意的結(jié)果。特別是用單抗腹水直接包被時(shí),因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類(lèi)似封閉劑的作用。
2. 在小鼠ELISA試劑盒間接法測(cè)定中,封閉一般是不可少的。
100546-200902 含量測(cè)定 100mg 苯磺酸左旋氨氯地平
100547-200401 鑒別 50mg 高烏甲素
100548-200401 含量測(cè)定 100mg 甲磺酸羅哌卡因
100551-200401 含量測(cè)定 100mg 甘草酸二鉀
100552-200701 供檢查用 50mg 奧美沙坦酯雜質(zhì)
100553-200601 檢查 50mg 奧美沙坦酯雜質(zhì)混合物
100555-200501 含量測(cè)定 100mg 尼美舒利
100556-200901 含量測(cè)定 100mg 鹽酸奧昔布寧
100557-200401 UV法含量測(cè)定 100mg 奧扎格雷
100558-200602 含量測(cè)定 50mg 鹽酸格拉司瓊
100559-200301 含量測(cè)定 50mg 鹽酸昂丹司瓊
100560-200301 含量測(cè)定 50mg 普羅布考
小鼠ELISA試劑盒