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小鼠ELISA試劑盒實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產(chǎn)生非特異結合了,不會影響實驗的準確度。
tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結合或結合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現(xiàn)YY-
附件:ELISA實驗中緩沖溶液等試劑的配置
ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?1) ELISA實驗包被緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(3) ELISA實驗稀釋液;(4)ELISA實驗終止液(5)ELISA底物緩沖液(6)小鼠ELISA試劑盒實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液(7) ELISA實驗ABTS使用液(8)ELISC。
1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC)) 英文名稱: 1,4-Benzenedithiol 質(zhì)量規(guī)格: >98.0%(GC) : 624-39-5
1,4-丁二胺雙鹽酸鹽 英文名稱: 1,4-Diaminobutane dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格: >98%,BR : 333-93-7
1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 英文名稱: 1,4-Butanediol 質(zhì)量規(guī)格: standard for GC,≥99%(GC) : 110-63-4
1,4-丁炔二醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 英文名稱: 2-Butyne-1,4-diol 質(zhì)量規(guī)格: Standard for GC, ≥99.5% (GC) : 110-65-6
1,4-對苯醌(標準品) 英文名稱: 1,4-Benzoquinone 質(zhì)量規(guī)格: 系統(tǒng)適用性檢查用 : 106-51-4
1,4-二(2-噻吩基)-1,3-丁二烯(>97.0%(GC)) 英文名稱: 1,4-Di(2-thienyl)-1,3-butadiene 質(zhì)量規(guī)格: >97.0%(GC) : 23354-93-0
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