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細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成分包括氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。氨基酸是組成細(xì)胞蛋白質(zhì)的基本單位。不同的細(xì)胞對氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細(xì)胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,即必須氨基酸,如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余為非必需氨基酸,細(xì)胞可以自己合成,或通過轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來。在 BHK21 細(xì)胞低血清培養(yǎng)時,為增加培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分,除了增加必須氨基酸的含量外,還應(yīng)增加非必須氨基酸的種類,并應(yīng)根據(jù)BHK21 培養(yǎng)和代謝的特點,均衡各種氨基酸的比例,有效降低代謝有害物的積累,從而提高BHK21 細(xì)胞低血基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基的效果。
在細(xì)胞培養(yǎng)基中,谷氨酰胺對 BHK21 細(xì)胞低血清培養(yǎng)至關(guān)重要。谷氨酰胺是作為能源及碳源物質(zhì)同時被細(xì)胞利用,也是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡,同時谷氨酰胺還能促進(jìn)細(xì)胞的良好貼壁性,在缺乏谷氨酰胺時,經(jīng)消化處理的細(xì)胞無法正常貼壁生長。因此,谷氨酰胺可提高 BHK21 細(xì)胞低血清培養(yǎng)的效果。同時應(yīng)注意到,而外多余的谷氨酰胺對細(xì)胞培養(yǎng)的危害性,高含量的谷氨酰胺會導(dǎo)致氨的積累,影響細(xì)胞正常生長。谷氨酰胺是一種zui不穩(wěn)定的氨基酸,在培養(yǎng)基中降解形成吡咯烷酮羧酸和氨。
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