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科研試劑-人包皮成纖維細胞
培養(yǎng)基 HFF-1細胞專用培養(yǎng)基：84%DMEM-H+15%FBS+1%丙酮酸鈉
傳代方法 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。
生長條件 37℃；5%CO2+95%空氣；
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態(tài) 成纖維細胞樣，長梭形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長
分離基物 取白人新生男孩的包皮制備獲得
應用領域 可供HN4、HN1、H1、H9等hES的飼養(yǎng)層細胞使用。
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