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雙鏈DNA中和緩沖液操作方法

2022-4-29  閱讀(775)

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雙鏈DNA中和緩沖液操作方法


人體各組織、細胞代謝產生的CO2,主要通過血紅蛋白和氧合血紅蛋白的運輸作用,被迅速運到肺部排出,故幾乎不影響血漿的pH,當產生比CO2酸性更強的酸(如磷酸、硫酸、乙酸等)時,血液中HCO3﹣/ CO2緩沖對便發(fā)揮緩沖作用,其中HCO3-可與代謝產生或外合產生CO2和H2O。增加的CO2大部分從肺部排出或通過血漿中蛋白質緩沖對和與之作用,,使〔CO2〕降低;減少的HCO3﹣可通過腎臟進行調節(jié)而得到補充,從而使〔HCO3﹣〕,〔CO2〕和〔HCO3﹣〕/〔CO2〕都恢復正常。當人體新陳代謝過程中產生的堿進入血液時,血液中的H3O+便立即與它結合生成水。H3O+的消耗有H2CO3的解離來補充,結果也使血液的pH 保持穩(wěn)定。


產品名稱:雙鏈DNA中和緩沖液


規(guī)格:100ml/500ml

保存:室溫

有效期:12個月

用途:又稱為中性轉移緩沖液,僅用于雙鏈DNA的雜交

說明:由Tris-HCl、氯化鈉組成,Ph7.4。

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操作步驟(僅供參考):

1、 按實驗具體要求操作。

2、或按如下步驟將凝膠置于變性溶液(堿性)中進行DNA 變性:

①轉移到不帶電荷的膜上:a 、將凝膠置于10倍凝膠體積的雙鏈DNA 變性緩沖液中,室溫放置45min ,并不斷輕輕振蕩。b 、用去離子水短暫浸泡凝膠,然后將凝膠浸沒于10倍凝膠體積的DNA 中和緩沖液Ⅰ中,室溫放置30min ,并輕輕振蕩;更換一次DNA 中和緩沖液Ⅰ繼續(xù)浸泡15min 。

②轉移到帶電荷的尼龍膜上:a 、將凝膠置于5-10倍凝膠體積的DNA 中和緩沖液Ⅱ中,室溫放置15min ,并不斷輕輕振蕩。b 、更換一次DNA 中和緩沖液Ⅱ繼續(xù)浸泡20min ,并不斷輕輕振蕩。


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