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人Ⅰ型膠原交聯(lián)C末端肽(ICTP)elisa試劑盒基本信息
膠原蛋白是大分子蛋白質(zhì)，其分子量在30萬以上，并不能被人體直接吸收。食入含膠原蛋白的食物必須經(jīng)消化道蛋白酶分解成單純的小分子氨基酸，才能被腸道吸收利用，再經(jīng)過機(jī)體復(fù)雜的生物化學(xué)反應(yīng)，合成人體需要的膠原蛋白，供給各組織器官的需要。由二個(gè)或二個(gè)以上氨基酸組成--蛋白肽。人體的吸收是以肽的方式進(jìn)行，食用蛋白肽的吸收利用率可達(dá)100%。肽的分子量、氨基酸排列順序不同所表現(xiàn)的功能就不同。膠原蛋白富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸。膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)中zui重要的組成部分。膠原蛋白肽是一種細(xì)胞外蛋白質(zhì)，它是曲3條肽鏈擰成螺旋形的纖維狀蛋白質(zhì)，膠原蛋白是人體內(nèi)含量zui豐富的蛋白質(zhì)，占全身總蛋白質(zhì)的1/3。一個(gè)60kg的成年人的身體內(nèi)約有3公斤膠原蛋白，主要存在于人體皮膚、骨骼、眼睛、牙齒、肌腱、內(nèi)臟（包括心、胃、腸、血管）等部位，其功能是維持皮膚和組織器官的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，也是修復(fù)各損傷組織的重要原料物質(zhì)。在人體皮膚成分中，有70%是由膠原蛋白所組成。
人Ⅰ型膠原交聯(lián)C末端肽(ICTP)elisa試劑盒操作步驟
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
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