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大鼠維生素B12(VB12)elisa試劑盒操作方法

2017-4-21  閱讀(1037)

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大鼠維生素B12(VB12)elisa試劑盒簡介    

維生素B12又叫鈷胺素,是*含金屬元素的維生素。自然界中的維生素B12都是微生物合成的,高等動植物不能制造維生素B12。維生素B12是*的一種需要一種腸道分泌物(內源因子)幫助才能被吸收的維生素。有的人由于腸胃異常,缺乏這種內源因子,即使膳食中來源充足也會患惡性貧血。植物性食物中基本上沒有維生素B12。它在腸道內停留時間長,大約需要三小時(大多數水溶性維生素只需要幾秒鐘)才能被吸收。維生素B12的主要生理功能是參與制造骨髓紅細胞,防止惡性貧血;防止大腦神經受到破壞。維生素B12是B族維生素中迄今為止發(fā)現zui晚的一種。維生素B12是一種含有3價鈷的多環(huán)系化合物,4個還原的吡咯環(huán)連在一起變成為1個咕啉大環(huán)(與卟啉相似),是維生素B12分子的核心。所以含這種環(huán)的化合物都被稱為類咕啉。維生素B12為淺紅色的針狀結晶,易溶于水和乙醇,在pH值4.5~5.0弱酸條件下zui穩(wěn)定,強酸(pH<2)或堿性溶液中分解,遇熱可有一定程度破壞,但短時間的高溫消毒損失小,遇強光或紫外線易被破壞。普通烹調過程損失量約30%。

大鼠維生素B12(VB12)elisa試劑盒操作方法 

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。

4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。    

    購買我司elisa試劑盒可以提供免費代測服務,客戶準備好樣本,上海和南京地區(qū)的客戶可以提供免費上門取樣服務。其他地區(qū)的客戶,樣本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送給我們。代測時間為5到7個工作日提供原始數據,分析數據, 實驗操作步驟以及實驗所用儀器。

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