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超氧陰離子清除能力試劑盒說明書
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體1mL×1支，4℃避光保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加4mL蒸餾水充分溶解。
試劑三：液體5mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑五：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。
產(chǎn)品說明:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質(zhì)、蛋
白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等，使其交鏈或者斷裂，引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，與機體衰老和
病變有很密切的關(guān)系，清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子，與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2－，NO2－與對氨基苯磺酸和α－萘
胺的作用生成紅色的偶氮化合物，在530nm處有特征吸收峰，樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm
的吸光值呈負相關(guān)。
天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
操作步驟:
一、樣品處理
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）
加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測。
2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入
1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后4℃，
10000g離心10min，取上清置于冰上待測。
3. 培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測。
4. 粉劑藥物可配制成相同濃度，比如1mg/mL。
三、計算公式
超氧陰離子清除率I%= （A 對照管-A 測定管）/ A 對照管×100%
注意事項：
1. 試劑一4℃可保存2 個月，配制好的試劑二4℃可保存一周，建議實驗前配制，并盡快使用。
2. 樣品處理完后立即進行測定，或者低溫保存不超過24 小時
