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β-木糖苷酶測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體2mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體35mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體35mL×1 瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：液體1ml×1支，4℃保存，10?mol/ml對(duì)硝基苯酚溶液。
產(chǎn)品說(shuō)明：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類(lèi)半纖維素降解的關(guān)
鍵酶，產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造
紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
β-木糖苷酶催化對(duì)硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚，對(duì)硝基苯酚在405nm 處有特征吸收峰，
測(cè)定405nm 光吸收增加速率，可計(jì)算β-木糖苷酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
一、粗酶液提取
1. 植物樣本：稱(chēng)取約0.1g 樣品，加1.0 mL 提取液充分冰浴勻漿，然后12000rpm，4℃，離心20min，
棄沉淀，取20μL 上清測(cè)定蛋白含量，剩余上清作為待測(cè)酶液。
2. 細(xì)菌、真菌樣本：收集約500 萬(wàn)個(gè)細(xì)胞，加入1.0 mL 提取液，超聲波破碎（冰浴，功率300w，
超聲3 秒，間隔7 秒，總時(shí)間3min）；然后10000rpm，4℃，離心10min，棄沉淀，取20μL 上
清測(cè)定蛋白含量，剩余上清置于冰上待測(cè)。
3. 標(biāo)準(zhǔn)液的處理：用試劑二將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0 ?mol/ml。
注意事項(xiàng)：
1、吸光度變化應(yīng)該控制在0.05-0.6 之間。否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計(jì)算公式中參與計(jì)算
的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。
2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定，可選用考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測(cè)定試劑盒進(jìn)行測(cè)定。
