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尿嘧-啶-DNA糖基化酶(UDG)使用說明

2023-6-6  閱讀(1243)

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尿嘧-啶-DNA糖基化酶(UDG)使用說明


產(chǎn)品簡介


Uracil-DNA Glycosylase簡稱UDG,來源于大腸桿菌,可催化含尿嘧-啶的 DNA 鏈中的尿嘧-啶(dU)堿基和脫氧核糖之間的 N-糖苷鍵發(fā)生水解,從而釋放游離尿嘧-啶。Uracil-DNA Glycosylase (UDG)可以水解含有dU的單鏈或雙鏈DNA,但不能水解RNA或含有dU的長度不超過6個堿基DNA寡聚體。UDG主要用于消除PCR擴(kuò)增過程中帶來的產(chǎn)物污染問題。


來源:來源于大腸桿菌,由大腸桿菌重組表達(dá)。


酶活定義:在37℃條件下,1 min內(nèi)催化60 pmol尿嘧-啶從含尿嘧-啶的雙鏈DNA上釋放所需的酶量定義為一個酶活單位。通過30 min內(nèi)從50 μL含0.2 μg DNA (104-105cpm/µg)的反應(yīng)體系中釋放[3H]-尿嘧-啶的量來確定酶活。


純度及濃度:SDS-PAGE檢測純度≥95%;5 U/μL。


失活:95℃孵育10 min可以使95% UDG失活。


酶存儲buffer:10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1 mg/mL BSA,50%glycerol,pH 7.4。


10х UDG Reactin buffer:200 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA, 10 mM DTT, pH 8.0。


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