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游離脂肪酸含量試劑盒操作詳情

2020-6-23  閱讀(1195)

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游離脂肪酸含量試劑盒操作詳情

 

游離脂肪酸,簡(jiǎn)稱(chēng):FFA,存在于人體內(nèi)的脂質(zhì),大致可以分為膽固醇、中性脂肪(三酸甘油脂)、磷脂質(zhì)等3種。游離脂肪酸是中性脂肪分解成的物質(zhì)。當(dāng)肌肉活動(dòng)所需能源--肝糖耗盡時(shí),脂肪組織會(huì)分解中性脂肪成為游離脂肪酸來(lái)充當(dāng)能源使用。所以,游離脂肪酸可說(shuō)是進(jìn)行持久活動(dòng)所需的物質(zhì)。


產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,室溫保存。

試劑一:自備。實(shí)驗(yàn)前一天,取一個(gè)玻璃瓶,按照正庚烷:無(wú)水甲醇:;lv仿=24:1:25 的比例配置(自備),蓋緊后混勻,室溫保存。

試劑二:液體 6 mL×1 瓶,室溫保存。

試劑三:粉劑×2 瓶,4℃保存。臨用前在試劑瓶中加入 13mL 無(wú)水乙醇,充分溶解,4℃可保存一周。

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 瓶,10mg 棕櫚酸,室溫保存。臨用前把試劑轉(zhuǎn)移到 10 mL 玻璃瓶中,加入 7.8mLlv仿充分溶解,即為 5μmol/mL 的棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。



產(chǎn)品說(shuō)明:

FFA 既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中 FFA 的濃度與脂類(lèi)代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。FFA 與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利用銅試劑法測(cè)定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。



自備儀器和用品:

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、一個(gè) 25 mL 玻璃瓶、一個(gè) 15mL 玻璃瓶、正庚烷、無(wú)水甲醇、lv仿、無(wú)水乙醇和蒸餾水。



操作步驟:


一、樣品中 FFA 提?。?/span>

1、血清中 FFA 測(cè)定:將所取血液,室溫靜置 1 h 后,于 4 ℃ 離心機(jī) 3500 rpm 離心 15min,取上層血清置于-20℃冰箱保存,待測(cè)

2、組織中 FFA 含量測(cè)定:組織用生理鹽水沖洗干凈后,用吸水紙吸取表面水分,稱(chēng)取約 0.1g,加入 1 mL 提取液,勻漿后,8000rpm,4℃離心 10min,取上清液,置冰上待測(cè)。


二、測(cè)定:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 550 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在 37℃水浴中預(yù)熱 30 min 以上。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)簩?biāo)準(zhǔn)品稀釋成 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。


游離脂肪酸含量試劑盒操作詳情

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