用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該目標(biāo)抗體的微孔中依次參加標(biāo)本或規(guī)范品、生物素化的抗該目標(biāo)抗體、HRP符號的親和素，ELISA試劑盒通過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的該目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，核算樣品濃度。
 

TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，通過規(guī)范曲線核算樣品中人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白濃度。

1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液或許會有結(jié)晶分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響成果。
3.各步加樣均應(yīng)運用加樣器，并常常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦運用排槍加樣。
4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)后再測定，核算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)。
5.ELISA試劑盒封板膜只限一次性運用，以避免交叉污染。