在運用Elisa試劑盒進行實驗的時候，需求留意許多疑問，比如溫育、顯色、包被等疑問。其間，包被是要特別留意的一個疑問，直接關系到實驗的效果。

包被的方法：將抗原或抗體固定在進程稱為包被(coating)。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯(lián)絡的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的效果。這種物理吸附對錯特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。

包被的條件：pH9.6碳酸鹽緩沖液  pH7.2的磷酸鹽緩沖液  pH7-8的Tris-HCL緩沖液

親和素生物素即用親和素先包被載體，參與生物素化的DNA，這種包被方法均勻、健壯，已擴展應用于各種抗原物質的定量測定。脂類物質無法與固相載體聯(lián)絡，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后參與ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精蒸發(fā)后，讓脂質天然干固在固相外表。
?

大分子蛋白質較小分子蛋白質一般富含更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體外表。不易吸附的非蛋白質抗原可用直接包被的抗原經固相抗體的親和層析效果，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法。

長處：實驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。

Elisa試劑盒參與包被液后，在4-8℃冰箱中放置過夜，37℃中保溫2小時。包被濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化，每批資料需通過實驗與酶聯(lián)絡物的濃度調和選定。一般蛋白質的包被濃度為10ng/ml-20ug/ml。