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ELISA試劑盒洗板時應(yīng)留意洗液不能混用

時間:2017-7-27閱讀:1335
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ELISA試劑盒適用于用于測定血清,血漿及有關(guān)液體樣本中有關(guān)含量或活性。用于檢查大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。多見ELISA試劑盒有白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、攪擾素、轉(zhuǎn)化生長因子、趨化因子、細(xì)胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。

 

自從20世紀(jì)60-70時代問世以來,Elisa法得到*科研工作者的認(rèn)可及推重,在歐美及我國取得很大的推行,尤其是國內(nèi)生化范疇的長足發(fā)展。ELISA試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)等許多的長處,它在檢查抗體、抗原等方面有很好的使用,深受廣大用戶朋友的喜歡。但是,在試驗過程中,需求留意許多疑問,比如洗刷疑問……。

 

洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵,然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的,并借助于親水基團(tuán)和水分子的作用,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況,然后脫離固相載體。ELISA試劑盒洗刷時洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。

 

ELISA試劑盒操作事項之洗刷:

洗刷在ELISA過程中雖不是一個反響過程,但卻決議著試驗的勝敗。ELSIA 即是靠洗刷來到達(dá)別離游離的和的酶符號物的意圖。經(jīng)過洗刷以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體的物質(zhì),以及在反響過程中非特異性地吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗刷時應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來??梢哉f在ELISA操作中,洗刷是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)導(dǎo)致操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)厲按請求洗刷,不得大意。

 

洗板時留意各種試劑盒的洗液不要混用。假如洗液需求稀釋,應(yīng)按請求稀釋,所用的水電導(dǎo)率在1.5us/cm 之下,洗液假如結(jié)晶應(yīng)待其融解后制造。確保洗板浸泡時間為40 秒左右,孔內(nèi)液體被洗板機(jī)吸收得越潔凈洗刷作用非常好,手藝洗板避免洗液在孔內(nèi)構(gòu)成氣泡。

 

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