一、六胺銀染色
1．*步準(zhǔn)備工作：配制六胺銀染液，將10％硝酸銀2．5ml倒入干凈的染色缸內(nèi)，加入2％硼砂5ml，液體呈乳白色，再加入3％烏洛托品40ml，染液逐漸呈透明狀。
關(guān)鍵詞：病理制片病理制片技術(shù)染色
一、六胺銀染色
1．*步準(zhǔn)備工作：配制六胺銀染液，將10％硝酸銀2．5ml倒入干凈的染色缸內(nèi)，加入2％硼砂5ml，液體呈乳白色，再加入3％烏洛托品40ml，染液逐漸呈透明狀。
2．第二步染色過程：事先把溫箱調(diào)至60℃?zhèn)溆?，切片?jīng)脫蠟至水，用1％過碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺銀染液放置60℃溫箱1 h，染真菌時(shí)間要相對短一些，一般情況下肉眼看到染液變色，切片呈棕色時(shí)從溫箱取出染色缸，倒掉染液，自來水沖洗1min，用0．25％氯化金調(diào)色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸鈉染5min,水洗，用蘇木精染液淺染，水洗、分化、沖水返藍(lán)，伊紅染10 s，zui后經(jīng)脫水、透明、封固。
3．圖示結(jié)果：基底膜與毛細(xì)血管間質(zhì)性物質(zhì)、真菌呈棕黑色，核呈藍(lán)色。
4．注葸事項(xiàng)
（1）掌握染色溫度和時(shí)間，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。
（2）真菌類染色時(shí)間相對要短，染色時(shí)間過長，切片染色過深，可用分色劑處理。
二、黏液卡紅染色
1．*步準(zhǔn)備工作：配制黏卡染液，將稱好的胭脂1 g、氫氧化鋁1 g倒入瓶內(nèi)，加入50％L醇100 rnl混合搖勻，再加入氯化鋁0．5g，水浴加溫逐漸煮沸并攪動(dòng)液體，使其充分溶解（注意染液容易外濺），數(shù)分鐘后，染液由紅色變成透明深紫紅色，冷卻后 將液體倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，過濾，放人冰箱備用。
2．第二步染色方法：染液使用時(shí)原液與蒸餾水比例為1：4稀釋.切片厚5 um，脫蠟至水，經(jīng)蘇木精染色2 min、水洗、分化、返藍(lán)后進(jìn)人黏卡液染色2 h以上，染液可以重復(fù)使用多次，但要適當(dāng)延長染色時(shí)間．切片水洗后，脫水、透明、封固。
3．圖示結(jié)果：黏液為紅色，胞核為藍(lán)色．
4．注意事項(xiàng)
（1）染液使用時(shí)比例為1份黏卡原液，4份蒸餾水。
（2）用酶消化對照染色特異性很大，消化時(shí)間為20 min。
（3）配制黏卡染液時(shí)要防止液體濺出。
三、石碳酸品紅染色
1．*步準(zhǔn)備工作
（1）配制鹽基性品紅飽和液：鹽基性品紅溶于乙醇內(nèi)。
（2）配制石碳酸水溶液：將石碳酸結(jié)晶放入熱水浴溶解后取5 ml與事先預(yù)熱的蒸餾水95ml勻備用．（以上二種液體可單獨(dú)保存）。
（3）石碳酸品紅染液：取鹽基性品紅溶液10 ml與5％石碳酸水溶液90 ml混合，使用前過濾。
2．第二步染色方法
切片厚度為6 um，脫蠟至水，石碳酸品紅染色30 min至1 h，（或用微波爐加熱10~20 s），水洗，用1％鹽酸乙醇分化洗掉切片上多余染液，水洗，0.1％美藍(lán)淺染，背景為淡藍(lán)色、沖水、晾干、封固。
3．圖示結(jié)果：抗酸桿菌呈亮紅色，背景呈淡藍(lán)色。
4．注意事項(xiàng)
（1）用微波染色時(shí)切片容易脫落．
（2）美藍(lán)染色宜淺。
四、奧辛藍(lán)一PAS染色
1．*步準(zhǔn)備工作
（1）配制奧辛藍(lán)染液；將奧辛藍(lán)1 g溶解于3％的醋酸溶液，調(diào)整液體PH值為2.5。
（2）配制PAS染液：將堿性品紅1 g加人煮沸的蒸餾水內(nèi)溶解，溫度降至50℃時(shí)加入亞硫酰氯1 ml（加亞硫酰氯時(shí)要在通風(fēng)廚內(nèi)進(jìn)行）放入冰箱過夜。加入活性碳2 g，搖動(dòng)混合液1 min，靜止10 min后，過濾于棕色瓶內(nèi)，放置冰箱保存。
2．第二步染色方法
（1）奧辛藍(lán)染色：切片脫蠟至水經(jīng)3％醋酸溶液l10min，切片直接進(jìn)入1％的奧辛藍(lán)染色10 min，水洗，必要時(shí)用1％的中性紅對比染色，水洗。
（2）PAS染色切片厚5um，脫蠟至水，用0.5％過碘酸氧化10min后流水沖洗1 min，用紙吸干切片周圍水分，用干燥的吸管吸取PAS染液，滴染10~20 min，流水沖洗1 min，用蘇木精淺染1 min，水洗、分化、返藍(lán)、然后進(jìn)行脫水、透明、封固。
3．圖示結(jié)果：PAS陽性物質(zhì)呈玫瑰紅色，胞核呈藍(lán)色。
4．注意事項(xiàng)
（1）加亞硫酰氯時(shí)要在通風(fēng)廚內(nèi)進(jìn)行。
（2）過碘酸恢復(fù)室溫才能使用（20℃以內(nèi)）。
（3）染色時(shí)要加對照片。
（4）氧化時(shí)間要限制在10 min內(nèi)。
（5）PAS染液易揮發(fā)使染色反應(yīng)遲緩或紅色太淺，加入數(shù)滴亞硫酰氯即可。
（6）如果染奧辛藍(lán)-PAS時(shí)，省略染蘇木精步驟。