連接酶鏈反應(yīng)

時間：2011-10-17閱讀：1534

連接酶鏈反應(yīng)（ligase chain reaction,LCR）是繼PCR后，新出現(xiàn)的一種更加完善的DNA體外擴增和檢測技術(shù)。在檢測點突變等方面具有*的優(yōu)點。

（一） LCR的原理

該技術(shù)是利用DNA連接酶構(gòu)建共價磷酸鍵，特異地連接雙鏈DNA，經(jīng)加熱變性、退火和連接等步驟后，再多次反復(fù)循環(huán)，從而使目的DNA得以大量擴增。

（二） LCR的主要用途
主要用途有以下三個方面。
1. 單堿基突變遺傳病的檢測
該技術(shù)在識別點突變方面優(yōu)于PCR，該技術(shù)首先用于單堿基突變遺傳病的診斷；據(jù)報道已用LCR識別了鐮狀細胞貧血患者珠蛋白基因發(fā)生的A→T替換。
2.
病原微生物的檢測可用于李氏桿菌、結(jié)核桿菌、淋球菌及沙眼衣原體等病原微生物種及亞種的鑒別。
3.
定向誘變LCR法能連接PCR擴增片段，進行多位點同時定向誘變，或隨機設(shè)計，因而是一種有效的基因改建和構(gòu)造方法。

總之，LCR設(shè)計*，在某些方面特別是檢測點突變方面是有優(yōu)勢的，目前尚不能為其他手段取代，它作為一種DNA擴增和檢測技術(shù)，具有很大的發(fā)展前景

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