在建立ELISA試劑盒方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)物的天生可達(dá)。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至劃定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如斯?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過(guò)程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。這就是為什么ELISA試劑盒反應(yīng)老是需要一定時(shí)間的溫育。
溫育常采用的溫度。室溫溫育時(shí)要平置于操縱臺(tái)上即可。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。
保溫的方式除有的儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA試劑盒板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜籠蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。ELISA試劑盒若用保溫箱，應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui后將板放在濕紗布上。應(yīng)留意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按劃定力求正確。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜，以形成zui多的沉淀。