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補(bǔ)體活性的測定

時(shí)間:2015-5-31閱讀:837
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血清總補(bǔ)體溶血活性(CH50)測定

試管法(改良Mayer法)

1.致敏羊紅細(xì)胞:2%綿羊紅細(xì)胞等量2U溶血素,混勻,置37℃水浴30min。

2.稀釋血清:待檢血清0.2ml,加緩沖液3.8ml,稀釋度為1:20。

3.配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管:2%綿羊紅細(xì)胞2ml加蒸餾水8ml,混勻,即為全溶血管。取全溶血管液2ml加緩沖液2ml,即為50%溶血管。

4.按下表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置37℃水浴30min,第10管為非溶血對照。

5.結(jié)果測定:取出試管,2 000r/min離心10min,對照管應(yīng)不溶血。肉眼比色,選與50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近兩管,再用分光光度計(jì)測(波長542nm 0.5cm比色杯)OD值,確定與標(biāo)準(zhǔn)管zui接近者為終點(diǎn)管,然后按下公式計(jì)算CH50值:血清補(bǔ)體CH50(U/ml)=(1/血清用量)×稀釋度。

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